NST-TEST IS SPONTANE I STIMULIRAN.

Na licu

Princip metode temelji se na sposobnosti neutrofila da apsorbiraju nitrozin tetrazolij i da ga vraćaju u granule netopivog difipana u obliku plavih granula. Regeneracija HCT energiju i proizvodi dobiveni su redoks reakcije „metabolički prasak” prate proces fagocitoze, u kojoj se formacija vodikovog peroksida, superoksid anion, singlet kisik.

HCT se doda u hepariniziranu krv, inkubira, a zatim se određuje postotak neutrofila koji sadrže dijamante difenazana u razmazima. Ovo je spontani NST, u normi je od 3 do 15%. Da bi se odredile zalihe baktericidne funkcije neutrofila, stimulirani HCT test. U tom slučaju, bušotini se dodaje stimulans fagocitoze (lateks, pirogen, zimosan itd.). Normalno, stimulirani HCT test je 40-80% veći od spontanog testa.

Ovaj test može se koristiti za diferencijalnu dijagnozu bakterijskih (visokih rezultata) i virusnih (normalnih pokazatelja) bolesti koje se javljaju kod groznice, leukocitoze, visokog ESR-a. Međutim, treba imati na umu da se visoki pokazatelji NST-testa opažaju u parazitskim invazijama, virusnim hepatitisima, plućnim plućnim lezijama, tuberkulozu. Osim toga, visoki rezultati ispitivanja uočeni su u mnogim ne-bakterijskim procesima: infarkt miokarda, frakture, kirurške intervencije, leukemija, u bolesnika s rakom.

Solution NST Krv pacijenta (+ heparin)

fiksaciju, bojenje, mikroskopiju

Difenazanske granule u neutrofilnim jezgrama

ODREĐIVANJE RAZINA DOBARA NA 50% HEMOLIZMU

Komplement (C) je složeni kompleks proteina krvne plazme koji sudjeluju u

upalni odgovor i imunološki procesi:

-ojačati fagocitozu kao opsonine,

-uzrokuju degranulaciju granulocita,

-obavljati regulatornu funkciju, stimulirati aktivnost različitih populacija limfocita, itd.

Načelo definicije temelji se na lizi eritrocita u prisustvu hemolitičkih protutijela i komplementa. Za pripremu ovog gemsistemu: ovce eritrocita + hemolitička seruma (serum hemolitička dobiven imunizacijom kunića s eritrocitima ovce, tj AT je ovce eritrocite - hemolizina). U nedostatku komplementa, liza crvenih krvnih stanica ne ide. Serum pacijenta se doda hemistički sustav u serijskim razrjeđenjima. Što je koncentracija kompleksa u krvi veća, to je intenzivna hemoliza

Norma je 40-80 CH 50.

Studije posljednjih godina pokazale su da je dijagnostičko određivanje pojedinih komponenti komplementa (C3, C4, C5, itd.) Mnogo dijagnostički. Određuju se pomoću ELISA, turbidimetrijske (jedna od vrsta apsorpcijske fotometrijske analize, temeljena na mjerenju intenziteta svjetlosti koji prolazi kroz suspenziju koju tvore čestice tvari u tekućoj fazi) i druge.

Dopuna djeluje aktivno u zaštiti tijela od infekcije i objektivni je pokazatelj imunološke reaktivnosti organizma. Svaki upalni proces s odgovarajućim odgovorom prati povećanje razine komplementa različitih stupnjeva težine. U primarnim i sekundarnim ID-ima primjećuje se nizak sadržaj komplementa. Komplement nedostatak promatrati u bolesti koje se pojavljuju uz formiranje imunog kompleksa (Ag-Ab), što dovodi do prekomjerne potrošnje komponente komplementa (SLE, akutni glomerulonefritis, autoimune hemolitičke anemije, bolesti jetre, sepse, opekotine, oštećenje tkiva i slično) kao i nasljednih nedostataka komplementarnih komponenti. U anafilaktičkim reakcijama dolazi do oštrog smanjenja komplementa.

HCT test, (NST fagocitna aktivnost, ispitivanje s nitrozin tetrazolijem), krv

HCT test procjenjuje aktivnost fagocita - krvnih stanica, koje mogu apsorbirati inozemne, uključujući patogene mikroorganizme. Fagociti krvi uključuju neutrofile i monocite.

Tijekom studije, kapljica krvi je stavljena na mikroskopski klizač, prevučen aktivirajućim agensom. Aktivirani su fagociti koji se pričvršćuju na staklo, tako da se formira plavi formazan iz bezbojnog ili blijedo žutog dušičnog tetrazolijuma. Broj NST-pozitivnih stanica procjenjuje se pod mikroskopom.

NST test praktički je besplatan: potrebna je mala količina krvi za studiju. Osim toga, za analizu nije potrebna posebna oprema. Međutim, NCT test je subjektivan, jer za procjenu rezultata, potreban je iskusni stručnjak. U tom smislu moguće su lažno negativne rezultate.

Značajno smanjenje funkcionalne aktivnosti fagocita događa se u kroničnoj granulomatoznoj bolesti. Ova nasljedna kronična bolest karakterizira nemogućnost fagocita za ubijanje bakterija. Kronična granulomatozna bolest se očituje dugotrajnim ponavljajućim (rekurentnim) bakterijskim ili gljivičnim infekcijama, uključujući infekcije koje ugrožavaju život.

Ova analiza omogućuje nam da procijenimo funkcionalnu aktivnost fagocita. Analiza pomaže u dijagnosticiranju kronične granulomatozne bolesti.

način

Referentne vrijednosti su norma
(HCT test, (NST fagocitna aktivnost, ispitivanje s nitrozinskim tetrazolijem), krv)

Informacije o referentnim vrijednostima indikatora, kao i sastav indikatora uključenih u analizu, mogu se malo razlikovati ovisno o laboratoriju!

NST-test (fagocitna aktivnost neutrofila)

* - 3% popusta prilikom narudžbe na web mjestu

** - uzorkovanje krvi nije uključeno u cijenu analize

Vrijeme izvedbe: 2-3 dana

Istražena biomaterija: krv s heparinom

Način određivanja: Chemiluminescent

NST test (nitrosinium tetrazolium test) procjenjuje aktivnost krvnih stanica fagocita sposobnih za upijanje stranih mikroorganizama. Fagociti krvi uključuju neutrofile i monocite / makrofage.

svjedočenje: zarazne bolesti, procjena učinkovitosti terapije, stanje imuniteta.

priprema: materijal za studiju - venska krv strogo uzeta na prazan želudac, ne manje od 6-8 sati nakon posljednjeg obroka.

rezultati:Povećanje razine NST-testa karakteristično je za prisutnost bakterijske ili virusne infekcije. Smanjenje vrijednosti karakterizira prisutnost kronične granulomatozne bolesti ili nedostatnost fagocitoze, uključujući kongenitalne. Kompletnija studija uključuje spontani i inducirani HCT test, kao i indeks fagocitoze, koji omogućuje razlikovanje različitih stanja imunološkog sustava.

* - 3% popusta prilikom narudžbe na web mjestu

** - uzorkovanje krvi nije uključeno u cijenu analize

Medicinske referentne knjige

informacije

sadržaj

imenik

Laboratorijski testovi

Klinička uporaba

Funkcionalna aktivnost fagocitnih krvnih stanica

Određivanje aktivnosti i intenziteta fagocitoze i HCT testa omogućuje procjenu stanja fagocitnog sustava, mogućnost uključivanja fagocitnih stanica u patogenezu bolesti i određivanje taktike liječenja.

Aktivnost fagocitoze (PF - postotak fagocitoze) - Prikazuje postotak fagocita koji mogu aktivno uhvatiti čestice.

Intenzitet fagocitoze (broj fagocitnog fagocita) - pokazuje broj čestica apsorbiranih jednim fagocitom.
Oba ova pokazatelja karakteriziraju apsorpcijski kapacitet fagocitnih krvnih stanica (neutrofila i monocita).

NST-test spontano - Prikazuje metabolički potencijal odmora fagocitnih krvnih stanica.

NST stimulirani test - isto s stimulacijom (analogno antigenskoj iritaciji u tijelu). Razlika između ovih pokazatelja (obično 1,5 ili više puta) ukazuje na metabolički potencijal fagocita i zapravo karakterizira njihov probavni kapacitet. Prema tome, smanjenje aktivnosti i intenziteta fagocitoze se smatra indikatorom slabljenja apsorpcijske funkcije fagocita, metaboličkog rezervata, kao nedostatka u njihovoj probavnoj funkciji.

Smanjenje funkcionalnu aktivnost fagocitnih krvnih stanica se promatraju kod kroničnih često periodičan bakterijske i gljivične bolesti različite etiologije lokalizacije, abrazije, tuberkuloza, kroničnog limfoglotochnogo prsten i respiratornog trakta, pijelonefritisa, piogeni infekcija, atopični dermatitis, bronhijalna astma, reumatizma, onkoproliferativnyh broja bolesti.

U akutnoj fazi bolesti:
- normalno djelovanje fagocitoze + normalnog ili intenziviranjem fagocitoze povećava + spontani NBT test + normalan ili smanjiti stimulira NBT test nije znak značajne povrede makrofagnog funkcije;
- Smanjenje fagocitoze aktivnosti povećan intenzitet fagocitoze + normalan ili povišen spontano NBT-testa + smanjene stimulirana NBT-testa ukazuju na povrede fagocita (u ovoj situaciji, ne samo da će učinkovito boriti protiv patogena, ali i doprinijeti njegovom širenju po cijelom tijelu).

U remisiji:
- smanjenje aktivnosti fagocitoze, povećanje njegove aktivnosti, smanjenje metaboličke pričuve (zbog smanjenja stimuliranog HCT testa) ukazuju na kršenje fagocitne funkcije kao jednog od mogućih uzroka bolesti.

U nedostatku odgovarajuće kliničke slike (gore navedene bolesti):
- povećanje stope spontanog NBT testa sa i bez promjene u stimulirane NBT-testa pokazuje prisutnost kroničnog upalnog procesa (u slučaju neidentificiranog izvora upale treba sumnjati bakterijskog porijekla).

Laboratorijski kriteriji nedostatak fagocitoze nisu jasno definirani. Smanjenje fagocitoze aktivnosti do 20% ili niže i / ili nema razlike između mjera spontana i stimulirana NBT test može biti naznaka prirođene nedostatak fagocitozu. Pokazatelji spontane stimulirane i NBT-testom, a ne prelazi 3%, osnova su za sumnju kronične granulomatoznu bolest. Sekundarna fagocitoza imunodeficijencije razvija najčešće ne toliko zbog smanjene funkcionalne aktivnosti fagocitne stanice, ali u stvari smanjuje njihov broj (neutropenija, leukopenija, pancitopenija).

Spontani test s NST

Spontani test sa NST (nitrosinium tetrazolium) omogućuje procjenu stanja baktericidnog mehanizma ovisnih o kisiku fagocita (granulocita) krvi in vitro.

Normalno, broj HCT-pozitivnih neutrofila u odraslih iznosi do 10%.

Ono karakterizira stanje i stupanj aktivacije unutarstaničnog NADP-H-oksidaze antibakterijskog sustava. Princip metode na osnovu smanjenja apsorbira fagocitnog topive boje NBT u netopljivi diphormazane utjecajem superoksid anion (na unutarstanične uništavanje infektivnog agensa poslije apsorpcije) proizvedenog u reakciji NADPH oksidaze. Pokazatelji NST testa su povećani u početnom razdoblju akutnih bakterijskih infekcija, dok se u subakutnom i kroničnom tijeku infekcijskog procesa smanjuju. Sanitacija organizma od patogena popraćen je normalizacijom pokazatelja. Oštar pad naznači dekompenzaciju anti-infektivne zaštite i smatra se prognostički nepovoljnim znakom.

Test s HCT igra važnu ulogu u dijagnozi kronične granulomatozna oboljenja karakterizirana prisutnošću defekata u NADPH oksidaze kompleksa. Za bolesnika s kroničnom bolešću granulomatoznom naznačena prisutnošću povratnih infekcija (upale pluća, limfadenitisu, apscesi iz pluća, jetre, kože) induciran Staphylococcus aureus, Klebsiella spp., Candida albicans, Salmonella spp., Escherichia coli, Aspergillus spp., Pseudomonas cepacia, Mycobacterium spp. i Pneumocystis carinii.

Neutrofili od bolesnika s kroničnom granulomatozna bolesti su normalna fagocitna funkcija, ali zbog oštećenja na NADPH oksidaze kompleksa ne mogu ubiti mikroorganizme. Nasljedna oštećenja NADPH-oksidaze kompleks u većini slučajeva povezan s kromosomom X, manje autosomno recesivno.

Smanjena spontano tijesto HCT karakteristika kroničnih upalnih procesa, urođene mane fagocitna sustava, primarne i sekundarne imunodeficijencije, HIV infekcija, malignih bolesti, teških opeklina, ozljeda, stres, loša ishrana, citostatični imunosupresivni tretman, izloženost ionizirajućem zračenju.

Povećava spontano tijesto HCT točka kada antigenske stimulacije zbog bakterijske upale (prodromalnom razdoblja periodu akutne manifestacija infekcije tijekom normalnog fagocitoze aktivnosti), kronične granulomatozu, leukocitoza, povećavaju citotoksičnošću ovisnom o antitijelu fagocita, autoimune bolesti, alergije.

Test krvi - NST: norma hematokrita i uzrok odstupanja

Laboratorijski test krvi može procijeniti ne samo tijek upalnog procesa nego i stanje tijela u vrijeme ispitivanja. Hematocrit u rezultatima testova krvi je vrlo važan pokazatelj.

NST u krvi: opis

NST je pokazatelj općeg testiranja krvi, što je važno za procjenu stanja ljudskog zdravlja

U općenitom krvnom testu HCT je hematokrit. Ovo je uvjetovani pokazatelj koji pokazuje postotak crvenih krvnih stanica u ukupnom volumenu krvi.

To je pokazatelj da ispravno zovemo broj hematokrita, ali u medicinskom radničkom okolišu češće je moguće čuti hematocrit.

Kako bi se utvrdilo koliko je ukupnog volumena sastavljeno od crvenih krvnih stanica, u laboratoriju se koristi poseban uređaj nazvan hematokrit. U izgledu, ona sliči staklenoj cijevi s fiksira. Stavlja se u centrifugu. Nakon toga oblikovani elementi se podmiruju i određuju gustoću krvi.

Razina hematokrita, ovisno o dobi osobe, ima različite pokazatelje.

Test hematokrita može se provesti za opći test krvi, s sumnjom na poliglobulin, policitemiju i unutarnje krvarenje.

Značajke pripreme i provođenja postupka

Pravilna priprema za analizu krvi za hematokrit je ključ uspjeha

Hematocrit se određuje iz rezultata općeg testiranja krvi. Priprema za prikupljanje krvi iz prsta je sljedeća:

  1. Nije neophodno pušiti prije testa, jer se spazma perifernih krvnih sudova smanjuje, kao rezultat toga, pristup prstima je teško, a teško je dobiti uzorak.
  2. Jedan dan prije uzimanja krvi ne smije jesti masnu hranu i alkohol.
  3. Kada koristite bilo koji lijek koji utječe na zgrušavanje krvi, obavijestite liječnika i ako je moguće, nemojte ga konzumirati na dan studija. To se odnosi na nesteroidne analgetike.
  4. Analize ne prolaze na pozadini virusne infekcije i neko vrijeme nakon oporavka. Opći test krvi se provodi na prazan želudac, međutim, studija se može izvesti 1-2 sata nakon jednostavnog obroka.
  5. Treba imati na umu da na rezultate mogu utjecati vanjski čimbenici: fizički stres, stresne situacije, pušenje, invazivne dijagnostičke metode itd. Dugi boravak na visokoj nadmorskoj visini povećava količinu hematokrita.

Da bi se odredio broj hematokrita, ispituje se kapilarna krv, pa se krv uzima iz prsta. Ponekad se venska krv koristi za proučavanje hematokrita i drugih pokazatelja.

Dekodiranje: normalna izvedba NST-a

Normalni NST u testu krvi varira ovisno o dobi i spolu osobe

Hematocrit može varirati tijekom cijelog života, jer se volumen krvi povećava, a broj jednakih elemenata varira u skladu s tim.

Hematocrit se izračunava prema slijedećoj formuli: HTS = RBCxMCV, gdje je RBC ukupni broj crvenih krvnih stanica, a MCV je prosječni volumen.

  • Najviše se dijagnosticira u novorođenčadi - do 60%.
  • Po godini, hematokrit smanjuje i može biti jednako nizak od 38%.
  • Od godine do 6 godina pokazatelj je 32-42%.
  • U djece mlađe od 9 godina - 33-41%.
  • U adolescenata mlađih od 18 godina - 34-48%.
  • U žena normalni hematokrit je u rasponu od 33-47%.
  • U muškaraca je 49-54%.
  • Tijekom trudnoće stopa je obično 31-35%, a trećeg trimestra povećava se do 40%.

Broj hematokrita važan je pokazatelj dijagnoze mogućih patologija, ali tumačenje rezultata treba provesti uzimajući u obzir sve ostale podatke.

Odstupanja od norme: povećanje pokazatelja

Ako razina hematokrita odstupa više ili manje od norme, onda to može ukazivati ​​na različita patološka stanja.

Porast hematokrita opažen je u sljedećim slučajevima:

  • Dehidracija tijela.
  • Teška opeklina.
  • Peritonitis.
  • Policitemija.
  • Anemija.
  • Infekcija crijeva.
  • Patologija jetre i dišnog sustava.
  • Bolesti srca.
  • S povećanjem hematokrita može se primijetiti primjena kortikosteroida.

U šećernoj bolesti, povećanje glukoze u krvi ima negativan učinak na krvne žile. Kao rezultat toga, dolazi do gladovanja kisika, a u tijelu se aktiviraju kompenzacijske reakcije. Na temelju ove pozadine, parametri krvi se mijenjaju, uključujući razinu hematokrita na većoj strani.

S visokim NST, povećava se viskoznost krvi. Kao rezultat toga, krv postaje viskozna i polako teče kroz žile, što povećava rizik od tromboze.

Pacijent se može žaliti na česte vrtoglavice, ukočenost udova, poteškoće s disanjem, otežano disanje.

Smanjenje razine NST u krvi može se obaviti na nekoliko načina: provođenjem eritrocita, primjenom antiagregata i antikoagulansa. Liječenje se provodi samo uz povišenu brzinu. Da bi se smanjio hematokrit, dovoljno je promijeniti dijetu, piti više tekućine, odreći alkoholna pića, pušiti i jesti puno hrane koja sadrži antioksidante.

Smanjena hematokrit: uzroci i simptomi

Najčešće niska razina hematokrita ukazuje na razvoj anemije

Smanjenje razine hematokrita može ukazivati ​​na ozbiljne kršenja hematopoetske funkcije

Glavni uzroci smanjenja hematokrita:

  • Anemija.
  • Stanjivanje krvi.
  • Neispravna hrana.
  • Kronični upalni žarišta.
  • Uništavanje crvenih krvnih stanica.
  • Dugo ostanite u ležećem položaju.

Smanjenje NST može se promatrati tijekom hiperhidracije, tj. povećana količina krvi, zbog zatajenja bubrega, trovanja, infektivne ili virusne bolesti. Hyperproteinemija također uzrokuje smanjenje hematokrita. Uz neke bolesti jetre, bubrega i krvnih žila, rezultati analize pokazuju smanjenje broja hematokrita.

Znakovi smanjenja hematokrita su:

  • Pomanjkanje daha.
  • Tahikardija.
  • Blijeda koža.
  • Gubitak kose.
  • Osjećaj umora.

Ako je smanjenje hematokrita zbog anemije, pacijent treba promijeniti dijetu kako bi se povećala hemoglobina i broj crvenih krvnih stanica. Važno je promijeniti svoj stil života, a zatim će se indikatori vratiti na normalu.

Više informacija o općoj analizi krvi može se naučiti iz videa:

Pronašli ste pogrešku? Odaberite i pritisnite Ctrl + Enter, da nas obavijestite.

Stanje imunosti u bolesnika s herpesom

Klinički ishod primarnog GI-a uglavnom je određen imunološkim stanjem tijela. Istovremeno, treba napomenuti da je priroda patogenih promjena u tijelu bolesnika s herpes je uglavnom zbog mogućnosti integracije virusnog genoma u genom domaćina, osobito u paravertebral ganglija, a staze ugođaj HSV i drugim herpes virusima krvnih zrnaca i stanica imunološkog sustava (crvena krvna zrnca, trombociti, granulociti, makrofagi, limfociti) - On promiče cjeloživotno Percy stentsii HSV strukture u ljudskom tijelu i uzrokuje promjene u stanični i humoralni imunitet. Osim toga, danas, GOP vidi kao zarazne (stečena) bolesti imunološkog sustava (Barinskaja F. i sur., 1986), u kojem je dugotrajna postojanost virusa u nekim slučajevima popraćen produktivne infekcije HSV u gotovo svim vrstama stanica imunog sustava da bi pokazala svoju funkcionalni poremećaj i potiče tvorbu imunodeficijencije (Barinskaja F., 1988;.. Kolomietc A. et al, 1992). SAD i druge istražitelji su pokazala da je glavna uloga u formiranju antiherpetic imunitet pripada stanične mehanizme koji uvjetuju u velikoj mjeri određuje kako će ishod primarne infekcije te učestalost i intenzitet recidiva (Barinskaja F. i sur, 1986 ;. Isakov VA, i sur., 1993). Trajanje imuniteta virusnih infekcija će se u velikoj mjeri određena svojstva virusa, te vrsti odgovora reakcije pacijenta.

Smatra se da je dovoljno visoke razine specifičnih antitijela u krvi pacijenata s ponavljajućim herpes virusne postojanost stabilizira, ali ne sprečava recidiv (Bocharov A. F., et al, 1982 ;. Semenova T. B., et al., 1987). Semenova T. B. et al. (1987) su pokazali da u teškim rekurentnih GOP s lezija kože i sluznice bolesti nastaje zbog visokog titra protutijela komplementsvyazy vayuschih sa smanjenim sadržajem kvantifikacije leukocita i limfocita iz periferne krvi, omjer populacija različitim limfociti.

Brojni istraživači (Barinsky IF et al., 1986, Isakov VA et al., 1991, 1997; Prigogine VK et al., 1990; Rakhmanova AG i sur., 1995), da je kod GI-a ukupni broj CD3 + stanica (T-limfocita uobičajen), CD4 + (T-pomoćnici), imunoregulacijski indeks (CD4: CD8) smanjen. Smanjena aktivnost prirodnih ubojica i stanična citotoksičnost ovisna o antitijelima, potisnula je sposobnost leukocita da sintetiziraju endogeni interferon. Otkrivene promjene su karakteristične za pacijente s umjerenim i teškim tijekem rekurentnog herpesa. Oni su registrirani u fazi relapsa, au fazi remisije postojala je pozitivna dinamika proučavanih imunoloških indeksa, no ostaju ispod norme. Izvedeno je složeno imunološko ispitivanje 148 bolesnika s genitalnim herpesom (GH) uzrokovanim HSV-om. 42% pacijenata imalo je teški tijek TT (recidiva najmanje 1 puta mjesečno), 33% imalo je umjereno (1 relaps u 2 do 3 mjeseca), a 25% imalo latentni oblik GH. I kao monoinfekcija HG-a kod 22% bolesnika, u drugim slučajevima otkriveno je različite mikrobne povezanosti.

U perifernoj krvi određena je količinom imunokompetentnih-kompetentno stanica (CD3, CD4, CD8 T-stanice i CD22 na B stanicama), što je proliferativna aktivnost limfocita pod djelovanjem T i B stanica mitogenima u RBTL, aktivnost anti-NK stanice telozavisimuyu limfocita citotoksičnost (AZTSTL). Istraživana fagocitnih i metaboličku aktivnost leukocita spontanom i induciranom testa HCT (ponovno ispitivanje nitroblue tetrazolij), razina kationskih proteina (KB) lakto-Ferrín (LF) i mijeloperoksidaze (MPO), pokazatelji tserulop-lazmina (CPU), transferin (TF), imunoglobuline i cirkulirajuće imunološke komplekse (CEC). Istražena je razina interleukina 1 i 2 (Tablica 12).

Kao rezultat ispitivanja bolesnika s pogoršanjem GI otkrili da je razina makrofagnog aktivnost leukocita je obično normalan ili tendenciju povećanja (Sl. 2). Značajno smanjenje broja fagocitnih stanica (manje od 30% po stopi od 52,5%) dogodilo se u malom broju bolesnika (frekvencija - 0,1). U isto vrijeme tijekom pogoršanja kroničnog procesa su značajno povećanje pokazatelja leukociti oksidaze aktivnosti na spontanu i inducirati u NBT testu u odnosu na kontrolnu skupinu (NBT spontano = 38,0 + 7,6%; HCT inducirane = + 60,0 6,9% u odnosu na 18,4 ± 2,1% i 36,9 ± 3,6% u kontrolnoj skupini;

Kada je remisija došla 2-3 tjedna nakon egzacerbacije, indeksi induciranog NCT testa smanjili su se (do 27,6 ± 2,9% u odnosu na 36,9 ± 3,6% u kontrolnoj skupini). U brojnim slučajevima (učestalost od 0,3), došlo je do smanjenja broja fagocitnih stanica, ca. Postotak fagocitoze bio je 16-30% u usporedbi s 41-68% u kontrolnoj skupini. Uz smanjenje funkcionalnu aktivnost leukocita su detektirani IgA povećanje krvnog (2.47 ± 0,19 g / l u odnosu na 1.90 ± 0.08 g / l, P u kontroli Fe3 +, a ugrađen je u molekuli apotransferina.

Laktoferin (LF) igra važnu ulogu u međustaničnoj suradnji fagocitnih stanica. Receptori za LF pronađeni su na monocitima, makrofagima, NG, aktiviranim T-limfocitima, kao i B-limfocitima (Naidu A.S., 1991). Apsorpcija LF mononuklearnih fagocita smanjuje njihovu sposobnost stvaranja hidroksilnog radikala i štiti stanice od autoperoksidacije membrane. Povećanje razine LF u krvnom serumu bolesnika s GI može se smatrati antioksidacijskom obranom koja se provodi neuralgijom i povoljnim prognostičkim znakom koji ukazuje na početak remisije (Bryazhikova TS i sur., 1995). Laktoferrin je marker specifičnih granula NG, na čijoj unutarnjoj membrani je skup receptora tih stanica. Izlučivanje LF iz specifičnih granula prati aktivacija polja receptora stanice zbog ugradnje receptorskih proteina u vanjsku membranu NG. U dinamici Svjedoci smo značajan porast LF, dostiže maksimalnu vrijednost u remisiji, to može biti popraćeno povećanjem funkcionalnu aktivnost NG s naknadnim aktivacije stanica mononuklearnih fagocit sustava koji nose eliminaciju patogena. Ipak, promatramo povišenu razinu CEC-a tijekom remisije, što upućuje na inferiornost MMC stanica, budući da HSV ima tropizam za te stanice i može ih oštetiti. Stoga, postoji neadekvatnost efektorskih stanica u fazi exacerbationa i remisije herpes simplexa, što je u ovom slučaju samo ravnomjerna ravnoteža između organizma domaćina i patogena, akumulirajući potencijal za sljedeći ciklus bolesti.

Poznato je da je fagocitoza praćena stvaranjem aktivnih oblika kisika (ROS), generiranim neutrofilaminima u značajnim količinama u početnim fazama stimulacije imunokompetentnih stanica. Oblikovanje ROS-a važan je čimbenik koji osigurava fagocitnu aktivnost neutrofila, eozinofila, monocita. Međutim, pretjerano visoke koncentracije ROS-a imaju destabilizirajući učinak na stanične membrane, iniciraju lipidne oksidacijske procese lipida, mogu uzrokovati depresiju fagocitne aktivnosti stanica. Da bi se deaktiviralo negativan učinak AFK na stanice i tkiva tijela, potonji ima antioksidacijski obrambeni sustav (AOP). Glavni enzim specifičnog AOP u tijelu je superoksid dismutaza (SOD). Uz SOD, aktivne komponente AOZ su katalaza, ceruloplazmin, glutation-peroksidaza, glutation, askorbinska i mokraćna kiselina, glukoza, manitol i slično.

Glavni protein koji sadrži bakar krvne plazme je ceruloplazmin (CP). Ona veže 95% svih bakra, koristi OH za enzimsku aktivnost u oksidaciji Fe2 + do Fe3 +, nakon čega je željezo vezano transferrinom. Bitno je da se oksidacija u Fe2 + Fe3 +, za razliku od ne-enzimatskom oksidacijom Fe2 *, u prisustvu kisika nije popraćena formiranjem superoksid anion (02). Stoga, u reakcijama oksidacije uključuju iona Fe2 + ceruloplazmin plazma je glavni antioksidans svojstven zamka za ROS (Loginov C Matyushin BN 1994; J. M. Gutterudge S. i suradnici, 1979.).

U serumu bolesnika s recidivom GH CPU razine bio značajno viši nego u zdravih pojedinaca, što ukazuje na povećanje antioksidativnog kapaciteta serumu akutne razdoblje bolesti * Faza kliničke remisije se karakterizira smanjenje koncentracije CPU, ali njegova aktivnost je bila još uvijek znatno viši nego u zdravih pojedinaca. To pokazuje sustava stresa HPA i remisije GI koji, navodno, zbog nužnosti inaktivacije povišenih koncentracija ROS.

Važni metali u enzimskoj proizvodnji ROS-a su metali promjenjive valencije (željezo i bakar). Glavna uloga transferina i laktoferina u tijelu je prihvaćanje slobodnog željeza koje ometa razvoj reakcija stvaranja hidroksilnog radikala (OH) kataliziranog željeznim ionima.

Drobot IV (1992) i VV Turkin (1994) pokazali su da djeca s pseudotuberculosis i infektivne mononukleoze (Epstein - Barrov virus) povećane razine ne samo im munoreaktivnoy oblik procesora, značajno povećana razina u krvi enzimom aktivnu frakciju ovog proteina. Potonji sugerira važnu zaštitnu ulogu ovog posebnog oblika procesora, što je očito zbog sposobnosti medoksidazy inaktiviraju slobodne radikale koji su dostupni u izobilju u upale. Osim toga, CPU pojačava proizvodnju antitijela, poboljšava proizvodnju IL-1 od strane makrofaga, pojačava proliferaciju citotoksičnih T-stanica i stanica-C. Tako, mi smo istražili metalloproteins (CPU, LF i HF) imaju ne samo antioksidativno djelovanje, već su također važna komponenta nespecifične D zistentnosti osigurava otpornost na bakterijske i virusne infekcije (VA Isakov et al., 1996; Turkin VV, 1994).

U zaključku treba napomenuti da s rekurentnim GI-om, sustavi imuniteta T- i B-stanica su depresivni i neuravnoteženi, koji igraju odlučujuću ulogu u antivirusnoj zaštiti. Istodobno se opaža funkcionalna inferiornost mnogih faktora nespecifične otpornosti organizma. Osim toga, povrede nalaze u imunološkom homeostaze su registrirani u relapsa fazi i remisije bolesti, čime se u velikoj mjeri unaprijed određen i objašnjavajući razvoj dugoročnog upornosti herpes virusa u tijelu s uspostavom relaps tijek bolesti. Ove okolnosti treba bez sumnje uzeti u obzir praktični liječnici u liječenju pacijenata s različitim oblicima herpetičke infekcije.

metoda odabira imunokompetenta i predviđanja učinkovitosti imunoterapije urogenitalnim infekcijama

Izum se odnosi na lijek i može se upotrijebiti za odabir imunokompetenta i predvidjeti učinkovitost imunoterapije u urogenitalnim infekcijama. Pokreće se HCT test u kojem se koriste imunotropni agensi, a reakcija se uzima u obzir na spektrofotometru, uzastopno određujući optičku gustoću kontrole i sve uzorke ispitivanja. Izračunajte indeks osjetljivosti za svaki lijek, a kod indeksa koji je jednak ili veći od 1,3, predvidjeti učinkovitu imunoterapiju, a za liječenje odaberite lijek s maksimalnim indeksom osjetljivosti. Metoda omogućuje povećanje pouzdanosti selekcije imunokompetentnog sustava i predviđanje učinkovitosti imunoterapije urogenitalnim infekcijama. 1 kartica.

Crteži na RF patent 2216739

Izum se odnosi na lijek, tj. Dermatovenereology, i može se koristiti za optimizaciju liječenja bolesnika s infekcijama pretežno seksualno prenosenim.

Do sada, nema sumnje da je važan čimbenik koji može utjecati na razvoj zaraznih bolesti, posebno infekcije, spolno prenosive bolesti, je stanje osjetljivosti organizma, ovisno o imunološki populacijske strukture [1, 2, 3, 4, 5, 6],

Povreda imunog sustava organizma je jedna od bitnih čimbenika patogenezi infekcija, osobito spolno prenosivih, koji utječu na glavne kliničke manifestacije bolesti, određivanje polimorfizma kliničkih simptoma iste bolesti u različitim pacijentima [2, 4, 6, 7]. Osim toga, promjene u imunološkom sustavu mikroorganizma kao rezultat upale uzrokovane infekcijom urogenitalnog, često su uzrok atipičnih struje, kao i komplikacije česte STI [7, 8, 9]. No, glavni problem za praktičare - je kompleksnost terapije kao klasične spolno prenosivih bolesti, a posebno one uzrokovane oportunističkih mikroorganizama i njihovih udruga.

Poznato je da se s gonokoknom infekcijom odvijaju i humoralne i stanične reakcije, ali se ne razvija zaštitni imunitet, koji može spriječiti ponovnu infekciju [10]. U međuvremenu, osim reinfekcije, superinfekcija je moguća uz očuvanje gonokoka u tijelu. Međutim, prema mišljenju istraživača, nemoguće je poricati potpuno zaštitnu ulogu imuniteta u gonoreju. Za gonoreju je karakteristična nepotpuna fagocitna reakcija (endocitobioza), u kojoj mikroorganizmi pokazuju povoljne uvjete za intracelularnu upornost [11]. Brojne studije također ustanovili da gonococci povezanost s drugim patogenim i uvjetno patogenih mikroorganizama dovodi do povećanja štetnih utjecaja na leukocitima [10, 12]. Također je došlo do kršenja fagocitne aktivnosti leukocita krvi. Slične promjene su opisani od strane autora i proučavanje lokalne imunosti u materijalu struganjem iz uretre sluznice i ejakulata kod pacijenata s raznim komplikacije urogenitalnih infekcija [4, 6, 8]. Mikoplazme utjecati ne samo epitelne stanice sluznice, ali također uzrokovati oštećenje neutrofila i makrofaga, negativno utječu na aktivnost fagocitoze u upalni proces [13, 14]. Studije mnogih autora pokazuju da fagocitni sustav u bolesnika s klamidijom ne funkcionira učinkovito [7, 8, 9]. Dakle, našli su smanjenje probavnih funkcija polimorfne nuclears periferne krvi otkriva mikrobne stanice-cilj - pokazatelje unutarstanične postojanosti klamidije i pratećih bakterijske flore. Klamidija ne postoji samo u membranskim zonama epitela i vaginalnim trichomonadama, već iu profesionalnim fagocitima (neutrofilima i makrofagima). Takav otpor fagocitoze klamidija može ukazivati ​​kako moćne mehanizme potiskivanja fagocitnog sustava i njegovih pacijenata izvorni zatajenjem [15, 16, 17].

Stoga, fagocitoza neuspjeh je jedan od vodećih patogenetskih mehanizama koji pridonose razvoju STI, produljene zaštite u organizmu domaćina. S tim, osobito vežu otporan na uretritis, vulvovaginitis i cervicitis, kao i povezan formiranje urogenitalne infekcije koje je teško tradicionalne terapije.

U tom smislu, razvoj metoda za liječenje bolesti urogenitalnog trakta, uzimajući u obzir stanje imunološkog sustava i predviđanje učinkovitosti ove terapije, jedan je od stvarnih problema veneremologije.

Poznato je metoda za odabir lijekova za imunokemikciju in vitro, uključujući određivanje površinskih markera na stanicama: E-rozeta (E-ROC). Kako bi se odredila osjetljivost limfocita na imunokompaktore, E-ROC reakcija je postavljena prema M.F. Mendes i sur. (1973) u opisu A.V. Karaulova i sur. (1999).

Međutim, ova metoda omogućuje procjenu promjene funkcionalne aktivnosti limfocita, naime, njihove populacije T stanica. Dok je imunološki obrambeni mehanizam za STI temeljen prvenstveno na fagocitne reakcije. Osim toga, metodologija je naporno, dugotrajna za izvođenje i procjena rezultata je vrlo subjektivna. Također je poznato da se u kliničkim laboratorijskim istraživanjima funkcionalna aktivnost neutrofila procjenjuje redukcijom nitro-tetrazolijem (NST) bez supstrata [5]. Ova reakcija odražava aktivnost mikrobicidno kislorodozavisimoy intraleykotsitarnoy aktivnosti i leukociti se koristi za procjenu ozbiljnosti septičkih bolesti u opstetricije i ginekološki i uroloških praksi. Međutim, kako bi se predvidjela učinkovitost odabranog tijeka imunotropne terapije, ova reakcija nije korištena.

NBT test temelji se na apsorpciju boje tetrazolija oblikovanih elemenata krvi do daljnjeg smanjenja njega pod utjecajem reaktivnih vrsta kisika unutar stanice i njegove membrane kao netopivi tamno plava diformazan boje. Za evaluaciju koristi se svjetlosna mikroskopija, izračunava se postotak neutrofila koji sadrže diformase. NST-test stavljen u dvije verzije: spontani i inducirani (s prodigiozan), količina precipitiranog dikazana služi kao kriterij intenziteta reakcije. Spontani HCT test odražava stupanj funkcionalne iritacije neutrofila in vivo, što je vrsta ogledala homeostaze. Pokazano HCT test karakterizira potencijalnu sposobnost neutrofila da reagiraju s "respiratornim praskom" na odgovarajuću stimulaciju. Odnos indeksa induciranog NST do spontanog HCT testa smatra se biokemijskim kriterijem spremnosti neutrofila za potpunu fagocitozu i naziva se funkcionalna rezerva. Standardni način za obavljanje NBT metode ispitivanja su vrlo naporan rad, dugotrajan, zahtijeva mikroskopiju vještine i nije lišena subjektivnosti. Potrebno je dva sata i trideset minuta da se dovrši. Moguće je uzeti u obzir rezultate NBT testu s spektrofotometar (Raznik SD, 1999), ali ovaj test se koristi od strane autora procijeniti učinak toksina pseudotuberculosis mikroba mehanizama toplinski stabilan.

Cilj izuma je razviti pouzdanu metodu za odabir immunocorrective praparata i predviđanja učinkovitosti imunoterapija koja vodi do brzog erradikatsii pobuda i oporavak. Zadatak provodi izvođenja spontanu i inducirane NBT-test, u kojem je inducirana ispitivanje koristi immunotropnye sredstva različite skupine, održavajući reakciju provodi se spektrofotometrijski određivanja optičke gustoće kontrolnih i svih ispitivanih skupina je izračunata indeks osjetljivosti za svaku formulaciju i indeksa jednak ili veći od 1 3 predvidjeti učinkovite imunoterapija za liječenje odabranog lijeka s maksimalnim indeksom osjetljivosti. Inducirani NBT-test omogućuje posredno suditi stimulativno djelovanje lijekova na fagocitozu veze stanice procjenjujući Pričuve funkcionalnu metaboličku aktivnost fagocitne stanica. Metoda se temelji na određivanju količine formazana nastalog u citoplazmi stanica nakon inkubacije s NBT i otopine lijeka u koncentracijama bliskim fiziološke.

Reakcija se provodi uobičajenim postupkom, međutim u ispitivane uzorke doda se 0,1 ml imunotropnih agensa različitih skupina (likopid, imunofan, leukinferon, mielopid). U svaku epruvetu dodajte 0,1 ml stanične suspenzije i 0,1 ml 0,2% HBT. Inkubirajte, centrifugirajte i procijenite rezultate na spektrofotometru. Indeks osjetljivosti svakog pripravka određuje se dijeljenjem rezultata ispitivanog uzorka s određenim pripravkom za kontrolu.

Dobiveni indeks predviđa djelotvornost imunoterapije. Pozitivan je pokazatelj koji je veći ili jednak 1,3 jedinice. Za liječenje bolesnika, propisajte lijek s maksimalnim indeksom osjetljivosti. Na primjer, pri odabiru imunokompetencije za pacijenta M, indeks osjetljivosti na leukinferon je 1,89; likopid - 1,64; imunofanom - 1.32 ridostin - 1,2, u ovom slučaju lijek izbora je leukinferon iako učinkovito tretirati s bilo kojim lijekom indeksom jednakim ili iznad 1.3.

Na temelju prikazano na tablice podataka (vidi. Kraj opis), može se zaključiti da je primjena HNK Test određuje lijek u 94% kada monourogenitalnoy infekcija i 78% kada je u kombinaciji STI, a bez uporabe inducirane NBT testa postotak liječenje samo 32% i 26% (odnosno), te odabir ispitnog immunocorrector E ROCK samo 54% i 38% (respektivno). Isti trend ustraje u eksponent posto relapsa pomoću NBT-testa, samo 6% relapsa, s monoinfection, u usporedbi s 68% - nema imunoterapija i 46% - Odabir testa E-Rock.

Primjer. Pacijent M., rođen 1964. godine, medicinska povijest 1245/2000, ušao je u KVD Vladivostok. Pacijent je pregledan prema obrascu Ministarstva zdravstva Ruske Federacije za ispitivanje bolesnika s STI. Dijagnoza: akutna trichomoniasis urethritis, komplicirana Chlamydia i Candida albicans (urogenitalna infekcija). Postignut je fazni integrirani etiotropni tretman, uključujući: antiprotozoalni lijek, antibakterijski agens, imunotropni lijek i tradicionalnu lokalnu terapiju. Nakon ambulantnog liječenja pacijent je ponovno ispitan nakon 21 dan. Prigovori o manjoj neudobnosti u uretru, bolovima tijekom odnosa, ujutro, bijelom premazu na penisu. Na drugom pregledu identificirana je Chlamidia trachomatis. Dijagnoza: kronični klamidijski uretritis, pogoršanje kroničnog prostatitisa. Postupak je proveden, uključujući: antibakterijski pripravak, protuupalnu terapiju, imunotropnu terapiju i tradicionalni lokalni i fizioterapijski kompleks. Dvostruko kontrolno laboratorijsko ispitivanje nije identificiralo mikroorganizam koji uzrokuje bolest, pacijent je bio ispražnjen. Dva mjeseca kasnije ponovno sam se obratio gore navedenim žalbama. Tijekom ispitivanja osjetljivost na antibakterijske lijekove je umjerena, stope fagocitoze su smanjene, spontani HCT test je manji od 1,2 jedinica, što određuje neekspektivnost propisivanja antibakterijskih terapija. Odlučeno je odabrati imunotropno sredstvo metodom koju predlažemo. Dobiveni su rezultati (likopid - 1,34, imunofan - 1,42, ridostin - 1,78, leukinferon - 1,81), lijek izabran je leukinferon. S obzirom na nedostatak lijeka s indeksom maksimalne osjetljivosti, u vrijeme liječenja, u ljekarnama u gradu Vladivostok, imunokorektivna terapija provedena je s lijekom ridostin. Kao rezultat predviđene imunoterapije, ponovljeni tijek liječenja s trostrukim kontrolnim pregledom i kliničkim kontrolom tijekom 6 mjeseci omogućio je uklanjanje dijagnoze koja se razmatra.

Postaviti cijelu reakciju i uzeti u obzir jedan sat i trideset minuta. To pruža stvarne uštede, sat vremena rada laboratorija i isključuje subjektivni faktor u procjeni citokemijske reakcije.

Dakle, predlažemo metodu odabira immunocorrector i prognoziranje immunokorregirujushchej terapija omogućava kraće vrijeme, s pravim uštede u vremenu, bez obzira na individualne obuke laboratorijskih liječnika, autentično izračunati osjetljivost indeksa i provesti izbor immunocorrective lijeka, uzimajući u obzir reaktivnost stanica sa zaštitnom ulogom, s urogenitalnim infekcijama. Izbor imunomodulatori s NBT testa omogućuje odabir Patogeno obrazloženi terapije za pacijenta.

književnost
1. Akovyban VA, Rezaikina AV, Tikhonova L.I. Karakteristike epidemioloških obrazaca koji određuju širenje spolno prenosivih bolesti u Rusiji. / / Bilten dermatologije i venerologije. - 1998. - 1. - P. 4-6.

2. Maltseva LI, Andrushko IA Patogenetska uloga poremećaja sustava hemostaze u slučaju urogenitalne infekcije kod žena. / Arhiv patologije. - 1995. - 5. - P. 118-122.

3. Evsikov ON, Sukhova L.P. Stanje imuniteta u bolesnika s određenim spolno prenosivim bolestima / / Abstracts. - Ryazan. - 1995. - 7-8.

4. Koshkin SV, Zaitseva G.A. Rezultati imunološkog nadzora u bolesnika s urogenitalnom klamidijom // ruski kongres dermatologa i venerologa, sedmog. Teze izvješća. - Kazan. - 1996. - 3. - P. 114-115.

5. Glazkova LK, Gerasimova NM Stanje čimbenika nespecifične zaštite tijela žena u klamidiji. / / Bulletin of Dermatology and Venereology. - 1998. - 1. - P. 7-10.

6. Gomberg MA, Soloviev AM, Nekrasov AV, Ivanova AS Imunoterapija za kroničnu uporni urogenitalni klamidij. // ZPPP. - 1987. - 4. - P. 34-36.

7. Loginova NS, Faizullin LZ, Zhdanov AV, Burmenskaya OV, Malinina EV, Bozhedomov VA, Sukhikh G.T. Status interferona bolesnika s urogenitalnom klamidijijom // ZPPP. - 1997. - 6. - 19-21.

8. Ryumin DV, Kovalenko EV, Novitskaya S.A. Karakteristike imunološkog statusa u bolesnika s kroničnim recidivirajućim urogenitalnim klamidijem. // Vest. Ros. Izv. Akusha. Hynek. - 1999. - 1. S. 26-28.

Semenov V.M. Kliničke i epidemiološke karakteristike klamidije. / / Russian Medical Journal. - 2000. - 1. - 48-53.

10. Dmitriev G.A. Detekcija herpesnog virusa u gonokoku. / Herald of dermatology and venereology. - 1984. - 5. - 23-24 str.

11. Kisina V. I. Urogenitalne zarazne bolesti: trenutno stanje problema / / Consilium medicum. - 2001. - Tom 3. - 7. - P. 307-310.

12. Vasiliev MM, Melkumov AA, Masyukova SA, Borovik V.Z. Kliničke značajke i liječenje kroničnih infekcija gonoreja-klamidija-ureaplazma kod muškaraca. // Bilten dermatologije i venerologije. - 1988. - 9. - str. 34-37.

13. Eshbaev I.U., Baluyants E.S. Klinička i laboratorijska dijagnostika i imunološke značajke urogenitalnog klamidiozu, ureapalzmoza i njihovim udrugama.// aktualna pitanja neplodnih brakova zbog bolesti, spolno prenosive bolesti. - Sverdlovsk. - 1989. - P. 39,40.

14. Delevectorsky VV, Osmonaliev MK, Yashkov GN, Akyshbaeva KS, Jalagania ID, Kakhidze DM Gonoreja-mikoplazmatska infekcija kod muškaraca (klinička i laboratorijska istraživanja). / / Bulletin of dermatology and venereology. - 1983. - 7. - 11-15.

15. Glazkova L.K. s et al. Genitalna klamidijska infekcija. Vodič za liječnike. Ekaterinburg. - 1994.

16. Glazkova LK, Gerasimova NM Suvremeni aspekti liječenja klamidijskih infekcija. // STDs. - 1996. - 4. - 9-13.

17. LK Glazkova i NM Gerasimova. Klinički i imunološki kriteriji za razvoj reproduktivnih poremećaja kod žena s genitalnom klamidijskom infekcijom // STD. - 1997. - 2. - P. 18-20.

FORMULA IZUMA

Metoda odabira immunocorrector i predviđanje učinkovitosti imunoterapije s urogenitalnih infekcija, koji obuhvaća nošenje NBT-testa, naznačen time, da je inducirani ispitivanje koristi immunotropnye znači, čuvanje reakciju se provodi u spektrofotometar sekvencijalno određuje optička gustoća kontroli i sve uzorke za ispitivanje je izračunata indeks osjetljivosti svaki lijek i indeksa jednaka ili prelazi 1,3, predvidjeti učinkovite imunoterapija za liječenje odabranog lijeka s maka imalnym indeks osjetljivosti.

Metoda za proučavanje metaboličke aktivnosti krvnih fagocita metodom nst-test

Izum se odnosi lijek, i to za Clinical Immunology, i može se koristiti za proučavanje metaboličku aktivnost fagocita. Žica ograda, 0,1 ml krvi iz prsta, u koju se doda 0,9 ml medija 199, zatim se doda 0,1 ml 0,1% tetrazolija i 0,1 ml lateks suspenzije s veličinom čestica od 1,5 mikrona, inkubiraju 40 minuta na 37 ° C. Dodatno za leukoconcentrate dobivena smjesa je centrifugirana, supernatant je dekantiran i talog se izlije u 10 minuta dodano je 2 ml fiksativa koja se sastoji od 3 dijelova etanola i 1 dijela ledene octene kiseline. Zatim se suspenzija stanica centrifugira, fiksator se usisava. Resuspendirane stanice u kapljica zasun prenosi na staklenu pločicu dobije razmaz se osuši, nakon čega je obojan neutralne crvene boje otopine tijekom 20 minuta. Zatim premazati mikroskopiruyut pod uranjanja s povećanjem od 90 x 10, rezultati studije ocijenjenih od strane računajući postotak formazan-pozitivnih stanica i izračunavanja citokemijske indeks stimulacije indeks NBT-testa. Ova metoda omogućuje vam da dobijete dovoljnu koncentraciju fagocita potrebno računati, čime se povećava točnost studije. 3 tablice, 1 pr.

Izum se odnosi na kliničku imunologiju, naročito na proučavanje metaboličke aktivnosti krvnih fagocita.

Generiran fagocita krvi reaktivnih vrsta kisika na respiratorni prasak jedna od veza fagocitoza potrebnih nespecifičnog imuniteta (Viksman ME, Mayansky 1979 Gerasimov IG 2006 Tretjakova IE sur., 2003). Jedan od alata proučavanja respiratorni prasak in vitro je reakcija redukcije nitro-plavo-tetrazol (NBT-test)

Postupak je poznata ispitivanja metabolizma kisika ovisnu periferne krvi (neutrofila Park BN, Fikrig SM, Smithwich EM infekcije i smanjenje nitroblutetrazolom neutrofili, dijagnostički pomoć // Lancet, 1968, vol.11, 2, P.532-534), koja obuhvaća: dobivanje pre- čisti leukocita suspenzija u gradijentu gustoće Ficoll-verografin, izolirana iz 5 ml venske krvi, a potom pomoću mikroskopa se odredio broj stanica koje sadrže granule formazana u citoplazmi nakon inkubacije s nitroplavog tetrazolija (NBT).

Nedostatak opisane metode je nemogućnost upotrebe metode za probira funkcionalne aktivnosti fagocita, budući da Koristi se čista suspenzija leukocita, izolirana iz krvi u gradijentu gustoće phycollo-verografina, što zahtijeva skup reagensa i velike količine krvi (3-5 ml).

U kojem se nalazi na bitne karakteristike predmetnog izuma je postupak za studije metaboličke aktivnosti neutrofila periferne krvi NBT - ispitivanje (Viksman ME, Mayansky opsonichneskih mogućnosti na faktore tetrazolija smanjenje reakcije humanih neutrofila // Bulletin of Experimental Biology i. medicine, 1980, T.89, №2, S.214-215) uzima kod nas kao prototip, ograda sadrži 0,1 ml krvi iz prsta, u koju se doda 0,9 ml medija 199, a zatim 0,1 ml 0,1% nitrozin tetra Cynthia (spontana NBT-test) i 0.1 ml lateks suspenzije s veličinom čestica od 1.5 mikrona (NBT - induciranu test), inkubiraju 40 minuta na 37 ° C.

Nedostatak prototipa je: subjektivizam i intenzitet rada izračuna formazan-pozitivnih stanica, određivanje u pripremi samo metaboličke aktivnosti neutrofila.

Prototip i izum za koji se traži zaštita imaju sljedeće bitne značajke: krv se koristi za istraživanje, određuje se količina krvnih fagocita koji sadrže formazanske granule pomoću mikroskopa, što ukazuje na njihovu metaboličku aktivnost.

S obzirom na prototipu predmetnog izuma ima sljedeće značajke: Osim dobivanja leukoconcentrate dobivene smjese centrifugirana, supernatant dekantira, talog tijekom 10 minuta, izlije se 2 ml fiksativa koja se sastoji od 3 dijelova etanola i 1 dijela ledene octene kiseline, te se zatim suspenzija je centrifugirana, držač usisan i stanice su ponovno suspendirane u kapljica zasun prenosi na klizača,, Dobivenu razmaz se osuši, nakon čega se oboji s neutralnim rubova bojom otopinu Noga 20 minuta, a zatim premazati mikroskopiruyut pod uranjanja s povećanjem od 90 × 10, rezultati ispitivanja procijeniti prisutnost formazan-pozitivnih stanica, što ukazuje da metaboličku aktivnost fagocita.

Izum se odnosi na rješenje problema koji se sastoji u razvoju metode za proučavanje metaboličke aktivnosti krvnih fagocita metodom NST testa.

Rješenje ovog problema omogućuje povećanje točnosti proučavanja metaboličke aktivnosti fagocita periferne krvi, imat će priliku provesti masovni pregled i smanjiti napornost i financijske troškove pregleda.

Da bi se postigao ovaj tehnički rezultat izuma zahtjevanih studija Postupak metaboličke aktivnosti krvnih fagocita po NBT-testa ograda sadrži 0,1 ml krvi iz prsta, u koju se doda 0,9 ml medija 199, zatim se doda 0,1 ml 0,1% tetrazolija (spontana NBT-test) i 0.1 ml suspenzije lateksa koji ima veličinu čestica od 1,5 mikrona (NBT - induciranu test), inkubira se 40 minuta na 37 ° C, naznačen time, dalje za leukoconcentrate dobivena smjesa je centrifugirana, supernatant je odbačen, a talog tijekom 10 minuta Aliwal 2 ml fiksativa koja se sastoji od 3 dijelova etanola i 1 dijela ledene octene kiseline, a zatim stanična suspenzija centrifugirana, zasun se ukloni i ponovno suspendirane u kapi zasuna Stanice su prenesene na objektno stakalce, a dobiveni razmaz se osuši, nakon čega je obojeni s otopinom neutralne crvene 20 minuta boja zatim premazati mikro kopirane pod uranjanja s povećanjem od 90 x 10, rezultati istraživanja procijeniti prisutnost formazana-pozitivnih stanica, čime se povećava točnost studije, smanjiti intenzitet rada od strane Nekoliko fagocita za razliku od prototipa

Ukupnost bitne značajke navedenog opće komplementarne, razviti i pročistiti slijedeće posebne karakteristike nove koje se pružaju rješavanju ovog problema dobije čisti leukocita suspenzije koja sadrži monociti i neutrofili omogućuje postupak smanjuje složenost u izračunavanju formazanski-pozitivnih stanica. Primjena dodatnog centrifugiranjem i drugi držač olakšava lizu eritrocita i dobivanje dovoljne količine fagocitnih potreban za brojanje..

S obzirom na prototipu predmetnog izuma ima sljedeće značajke: Osim dobivanja leukoconcentrate dobivene smjese centrifugirana, supernatant dekantira, talog tijekom 10 minuta, izlije se 2 ml fiksativa koja se sastoji od 3 dijelova etanola i 1 dijela ledene octene kiseline, te se zatim suspenzija je centrifugirana, držač usisan i ponovno suspendirane u kapi zasuna stanice su prenesene na objektno stakalce, a dobivena razmaz se osuši, a zatim obojene s bojom otopinom neutralne krasnog 20 minuta, a zatim premazati mikroskopiruyut pod uranjanja s povećanjem od 90 × 10 za određivanje prisustva formazan pozitivnih stanica.

Između osobitosti i tehničkog rezultata, postoji sljedeća uzročna veza: Metoda je složena, osjetljivija i jeftinija, dostupna za masovno ispitivanje u bilo kojem laboratoriju. Fiksator se koristi za induciranje lizu crvenih krvnih stanica, pričvršćivanje leukocita pri njihovom dobivanju u čistoj suspenziji. Dodatni centrifugiranje pomaže pri dobivanju dovoljne koncentracije fagocita. U jednom pripravku može se odrediti i metabolička aktivnost monocita i neutrofila.

Prema dostupnim informacijama autori, skup bitnih značajki koji karakteriziraju bit izuma koji se traži, nije poznat iz stanja tehnike, što omogućuje zaključivanje da izum ispunjava kriterij "novosti".

Prema autorima suština zahtjeva izuma ne bi trebao biti za osobu koja poznaje izričito u stanju tehnike, jer to nije otkrivena je gore spomenuto utjecaj na dobivene tehnički rezultat - novi objekt nekretnina - skup atributa koji razlikuju od prototipa zahtjeva izuma, koja omogućuje da se zaključiti njegova usklađenost s kriterijem "inventivne razine"

Set značajnih značajki karakteriziraju supstancije iz izuma se u načelu mogu ponovno upotrijebiti u medicini za dobivanje tehnički rezultat koji se sastoji u određivanju metaboličku aktivnost fagocita periferne krvi, što omogućuje da se zaključiti da izumu kriterij „industrijska primjenjivost”

Ovaj postupak se provodi kako slijedi: 0,1 ml krvi iz prsta, u koju se doda 0,9 ml medija 199, zatim se doda 0,1 ml 0,1% nitroplavog tetrazolija (NBT - spontano test) i 0.1 ml suspenzije lateksa s veličinom čestica od 1.5 mikrona (NBT - induciranu test), inkubira se 40 minuta na 37 ° C, naznačen time, dalje za leukoconcentrate dobivena smjesa je centrifugirana tijekom 10 minuta pri 1000 okr / min, a supernatant se odbaci, a talog se izlije u 10 minuta 2. ml fiksiranje se sastoji od 3 dijelova etanola i 1 dijela ledene octene kiseline, a potom uvodi ES stanice su centrifugirane 10 minuta pri 1000 okr / min., bravu odsisavanjem i ponovno suspendirane u kapi zasuna Stanice su prenesene na objektno stakalce, a dobiveni razmaz se osuši, nakon čega je obojeni s otopinom boje neutralnog crvenila tijekom 20 minuta, a zatim premazati mikroskopiruyut pod uranjanja s povećanjem od 90 × 10, rezultati studija procjenjuje prisustvom formazan-pozitivnih stanica, što ukazuje da je metabolički aktivnost fagocita. Korištenje bravu i dodatno centrifugiranje, dopušteno povećanje točnosti, smanjiti intenzitet rada istraživanja u 2-5 puta.

Da bi se odredila učinkovitost predložene metode, ispitivane su% formazan-pozitivnih stanica, citokemijski indeks i stimulacijski indeks NST-testa u donatorima izračunati su tradicionalnim i zahtijevanim metodama. U svrhu izračunavanja indeksa citokemijskih aktivnosti (CPA), vizualna procjena količine granula difipana u fagocitima izvedena je primjenom Kaplow L. S. principa. prema formuli

(2 × c) + (3 × d) + (4 × e) 100 (0 × a) +

gdje a, b, c, d, e su broj 0, 1, 2, 3, 4 stupnja. Rezultati pokazuju da je predložena metoda osjetljivija i točnija (Tablica 1), dodatno omogućuje određivanje citokemijskog indeksa i stimulacijskog indeksa NST-test monocita. (Tablica 2)