Institut za imunologiju Martynov Alexandr Igorevich

U muškaraca

(21), (22) Primjena: 2001119332/14, 13. srpnja 2001

(24) Datum početka roka valjanosti patenta:
2001/07/13

(45) Objavljeno: 2003/10/06

Popis dokumenata navedenih u izvješću o
pretraživanje: OSTROUMOV AI Istraživanje prirode alergijskih aktivnosti nekih vrsta biljnog peluda. - Bulletin of Experimental Biology and Medicine, 1979, br. 9, str. 332-333. SUKHODEEVA G.S. Formiranje alergije peludi kod zamoraca nakon specifične imunoterapije bakterijskim alergenom. - Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology, 1986, No. 8, str. 75-79. PADYUKOV LN i sur. Upotreba izoelektričnog fokusiranja za procjenu sastava alergena peludi. - Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology, 1987, No. 8, str. 94-97. LAVRENCHIK Ye.I. i drugima, komparativna procjena biološke aktivnosti alergena i alergoida od polena iz biljaka metodom dvostruke radijalne imunodifuzije. - Journal of Microbiology, Epidemiology and Immunobiology, 1989, No. 9, str 94-96.

Adresa za dopisivanje:
115478, Moskva, Kashirskoye sh., 24, zgrada 2, Institut za imunologiju, zamjenik. Redatelj AI Martynov

(71) Podnositelj zahtjeva:
Petrov Rem Viktorovich,
Khaitov Rakhim Musayevich,
Nekrasov Arkadij Vasilievich,
Fedoseyeva Vera,
Natalia Grigorievna Puchkova,
Kamysheva Valeria Alekseevna,
Martynov Alexander Igorevich,
Institut za imunologiju

(72) Autor (i):
Petrov RV,
Khaitov RM,
Nekrasov A.V.,
Fedoseeva VN,
Puchkova NG,
Kamysheva VA,
Martynov A.I.

(73) Nositelj (e) patenta:
Petrov Rem Viktorovich,
Khaitov Rakhim Musayevich,
Nekrasov Arkadij Vasilievich,
Fedoseyeva Vera,
Natalia Grigorievna Puchkova,
Kamysheva Valeria Alekseevna,
Martynov Alexander Igorevich,
Institut za imunologiju

(54) ALLERGOTROPIN ZA LIJEČENJE POLINOSA I METODA LIJEČENJA POLIJEVA

Izum se odnosi na lijekove, naime, imunologiju i alergologiju, te se bavi liječenjem polinoma. Suština izuma sastoji allergotropin allergoid alergijske biljaka pelud trava - Timothy, breza, kadulje dobiva izlaganjem ukupne dio se sastoji od većih i manjih alergene Mw 3-90 kD spojeva koji uključuju reaktivne proteinske skupine modificirane pretežno s formaldehidom i s njim povezanim polioksidonom. Za liječenje pacijenta koji se daje polynosis allergotropiny počevši od razrjeđenja 10 -4 u toku 15 injekcija. Tehnički rezultat je dobivanje allergotropinov temelji allergoidnyh oblici peludnih alergena imaju u usporedbi s izvornim alergen i izraženijih imunogenih alergena svojstva. 2 s. i 2 zp. f-ly, 6 kartica.

Izum se odnosi na područje medicine, naime, imunologiju i alergologiju, a odnosi se na liječenje alergijskih bolesti, osobito pollinoza.

Poznato je pripravak koji sadrži polimerni nosač polioksidonija. Na primjer, kompleks proteina hemaglutininskog virusa i neuraminidaze povezane s nosačem polioksidona koji doprinosi povećanju imunogenosti (1).

Poznata je ljekovita supstancija za liječenje pollinoze, koja je supernatant kulture autolognih mononuklearnih stanica stimuliranih fitouhemaglutininom s koncentracijom proteina od 150-200 ug / ml (2).

Također poznat je postupak za liječenje polinoza elektroforezom endonasal ljekovita tvar, što je supernatant kulture iz autolognih mononuklearnih stanica stimuliranih s fitohemaglutininom u količini od 1-2 ml pri koncentraciji proteina od 150-200 ug / ml (3).

Trenutno, međutim, specifična imunoterapija (SIT) osoba koje su alergične na pelud, koristi vode sol izdvaja nedostatak je visok sadržaj balastnih tvari koje su potencijalni alergeni, što stvara rizik za pročišćavanje - anafilaktički šok reakcija dobivanja.

Cilj predmetnog izuma je osigurati visoko djelotvorno sredstvo i postupak za tretiranje pollinoze s kompleksnim pripravkom (alergotropin) koji se temelji na alergoidnim oblicima biljnih peludnih alergena i imunomodulatora, polioksidonija.

Allergotropin temelju allergoidnyh tvori pelud alergena polioksidonija i ima, u usporedbi s nativnim alergen, izraženije i imunološke karakteristike alergen (razine IgG-antitijela blokiraju u laboratorijskim hiposenzibilizacija 3 puta viših životinja nego kada je nativni alergena za desenzibilizaciju).

Kako bismo riješili zadatak i postigli ovaj tehnički rezultat, predlažemo grupu izuma ujedinjenih zajedničkim inventivnim konceptom.

Lijek za liječenje allergotropin polynosis sadrži allergoid pelud konjugiran sa sintetičkim imunomodulator-polioksidoniem, tako dobivene allergoid utjecaj na ukupnu frakciju koja se sastoji od većih i manjih alergene s MM = 3-90 kDa - spojevi koji sadrži protein reaktivnu skupinu, modificirana uglavnom formaldehid.

Allergoid može se dobiti podvrgavanjem ukupnog dio se sastoji od većih i manjih alergene (s MM = 3-90 kDa), aldehida ili drugih spojeva za blokiranje reaktivne skupine proteina, u ovom slučaju - s formaldehidom. Alergoid je kemijski modificiran alergenski pelud i ima prednosti nad posljednjim, jer s kemijskom modifikacijom, dolazi do smanjenja alergenosti i rizika od anafilaktičkog šoka.

Predlaže se i postupak liječenja pojedinaca koji pate od alergija na pelud biljke: timothy, birch, pelud, koristeći allergotropin. Alergotropin lijeka počinje se primjenjivati ​​pacijentu s razrjeđivanjem od 10-4 za liječenje do 15 injekcija.

Među terapeutska i preventivna mjera za borbu protiv atopičkih alergijskih bolesti, najvažnija faza je specifična hiposenzibilizacija terapija, koja osigurava etiopathogenic pristup u liječenju pacijenata koji pate od peludi allergoid. Međutim, korištenje postojećih komercijalnih alergena ne zadovoljava sve zahtjeve kliničarima, allergists, jer su lijekovi imaju izraženu alergijske aktivnost, au nekim slučajevima potiče nastanak lokalnih i sistemskih alergijskih reakcija, pogotovo u vrlo osjetljivih pacijenata. Takve komplikacije obično dovode do činjenice da tijek specifične imunoterapije preseason (SIT) postaje produljen. Postoje prepreke za postizanje optimalne konačnu dozu prije nego što je sezona počinje cvjetanje alergene biljke, koje značajno utječe na učinkovitost liječenja u bolesnika koji su osjetljivi na pelud.

Eliminirati ove nedostatke vodeni ekstrakti peludi sol kemijski modificirani formaldehida (4, 5), glutaraldehid (6, 7), urea (8), polietilen glikol (9, 10).

Liječenje alergena sa formaldehidom potiče povezivanje aminokiselina koje čine međusobno alergene. Takav proces kondenzacije proteinskih molekula s niskom molekularnim spojevima, koji uzrokuje povećanje molekulske mase, proučio je Raikis BI i Voronin NI, 1987 (11). Povećanje molekularne težine alergoida uzrokuje adjuvantni učinak na organizam. Prisutnost lizina i arginina u inkubacijskom mediju s formaldehidom u nekim slučajevima povećava imunogenost alergoida.

Neki autori vjeruju da je potrebno upotrijebiti što je više moguće kompleks sastojaka peludi s alergijskom aktivnošću koja može uzrokovati senzibilizaciju pacijenata. Ovdje valja napomenuti da, bez obzira na stupanj pročišćavanja izvornog alergena, moguće je postići oštro smanjenje alergenosti i održati imunogenost u alergijskim oblicima alergena.

Moguće je da su neki proteinski spojevi, koji su labilniji od glavnih alergena, inaktiviraju tijekom formalizacije.

Homocitotropna antitijela su osjetljiva na djelovanje 2-merkaptoetanola, pa se njihovo značajno smanjenje opaža.

Homocitotrofna antitijela na alergiju kod zečeva pojavljuju se kasnije, u usporedbi s alergenom.

Razlike allergoid djelomični sastav i izvor alergena, kao što je definirano u gel filtracije i elektroforezom su zbog, očito, utjecaj formaldehida na dijalizira razvoju procesa i ekstrakt kondenzacije „unakrsno povezivanje” visoke i niske molekularne komponente izvornih alergenima metilenskih mostova.

Postoji razlog za vjerovanje da niske molekularne komponente izvornog alergena nisu balast i potrebno je osigurati njihovu sigurnost u alergiju.

U srcu proizvodnje alergoida je interakcija reaktivnih aldehidnih skupina s amino skupinama alergena. Formalizirani alergen sadrži smjesu komponenata s različitim molekulskim masama, uglavnom dimerima i trimerima, što je zbog dodavanja relativno malih molekularnih težinskih dušikovih spojeva na molekulu alergena i zbog procesa polimerizacije.

alergen pretvorba allergoid kemijskom modifikacijom u prisutnosti formaldehida, što dovodi do interakcije komponenti visoke i niske molekularne težine, pomaže očuvanju svojstva allergoid induciraju sintezu antitijela. Ova akcija je pojačan zbog krute i stabilnu strukturu allergoid molekule otporne na učinke denaturanata razliku od originalnog alergen, a također pridonosi produljenju akcije allergoid jer je njegova uništenja u tijelu pacijenta će biti sporiji.

N.A.Illyutovich (1983) uočili su kako je sadržaj IgG-specifičnih antitijela kod pacijenata tretiranih allergoid, 1,7 puta razinu „blokiranje” antitijela u ispitanika primanje alergen (12).

Otkriven je izravan odnos između vrijednosti konačnih doza i sadržaja "blokirajućih" antitijela u bolesnika liječenih alergenom.

Redukcija allergenicity alergena u polimerizira povezani, s jedne strane, sa smanjenjem broja antigenske determinante kao rezultat reakcije s aldehidne skupine, s druge strane - na nedostupnosti reagin druge determinante skriveni unutar polimera velike molekularne težine. Pozitivan učinak na imunogenost vrši se povećanjem molekularne težine i stvaranjem čvršćih intramolekularnih veza.

Proizvodnja terapeutskih alergena visoke čistoće je skup i dugotrajan proces. To je dodatno otežano činjenicom da se kod alergijskih bolesti najčešće primjenjuje polisenzitizacija mnogim alergensima različite prirode, a pročišćavanje svake od njih ima svoje osobitosti.

Jedan od nepobitne prednosti allergoidnyh alergije su pravilno napravljeni shema UIO je da ne uzrokuje sistemske reakcije kao što su generalizirane urtikarije, svrbeža, suhoće u grlu, nazalni simptomi s astmom i bez njega. Kod provođenja reakcije javljaju SIT sistemski alergenima eliminiran antihistaminika.

Allergoidi dobiveni kao rezultat tretmana alergena s glutaraldehidom, prema našem mišljenju, imaju niz nedostataka: priprema nije stabilna, polimerizacija i depolimerizacija nastavljaju se 6 mjeseci. Način korištenja glutaraldehida u ljudskom tijelu je nepoznat. Reakcija polimerizacije nije kontrolirana, smjerna sinteza je nemoguća.

Jedna od faza razvoja lijekova za liječenje alergije na pelud (alergije Timoteju pelud trava, breze, i drugi. Plant) je stvaranje allergotropinov na bazi polena allergoids rekao postrojenja povezana s makromolekulnim polioksidoniem imunomodulator, to jest pripravaka s izraženim imunogenim svojstvima, ali imaju nisku alergijsku aktivnost. U razvoju tih lijekova su uzeti u obzir prednosti njegovih sastavnih dijelova, od kojih svaki koristi u medicinskoj praksi: allergoid i polioksidonija. Polioksidony - domaće lijeka sa širokim spektrom farmakološkog djelovanja, koja je bez premca u svijetu i na strukturu i na svojstva [1]. Se lijek upotrebljava kao imunomodulator, detoxicant i imunostimulacijskog nosač produljeno otpuštanje farmakološki aktivnih spojeva. Polyoxidonium (ON) odobren je za uporabu u 1996, reg.nomer 96/302/9, FS 42-3906-00. Trogodišnji iskustvo u aplikacijski softver je pokazala svoju visoku kliničku djelotvornost u liječenju gotovo svih srednjih imunodeficijencije država. PO se odnosi na klasu vodotopljivih derivata heterokainskih alifatičnih poliamina. U ima širok spektar immunopharmacological svojstva, bitno važne za stvaranje na temelju nje cjepiva, visoku bioraspoloživost, sposobnost lučenja, koristite sigurnost. Softvera u širokom rasponu doza aktivira makrofaga veza humoralni imuni odgovor, posjeduje antiinfektivnu i antitumorske aktivnosti, povećava otpornost na stanične membrane citotoksičnog djelovanja i smanjuje toksičnost lijeka, kada se daje zajedno.

Prilikom stvaranja cijepljenja i terapeutska sredstva nove generacije je visoka imunostimulator nosač antigena i allergoids softver pruža veću stabilnost antigena, čime se povećava imunogenost na nižim dozama cijepljenih antigena učinkovitije stvaranje imunološkog pamćenja na antigene i povećanja učinkovitosti preventivnih cjepiva, kao i poboljšanu sigurnost cjepiva. Modifikacija antigena različite prirode na imunostimulante visoke molekulske mase omogućava poboljšanje imunogene aktivnosti. Ulazak softver za allergoid smanjuje alergijske aktivnost, poboljšati sigurnost lijeka i smanjiti rizik od komplikacija prilikom primjene na osjetljivi na tijelu. Uvez allergoids sa softverom omogućuje značajno poboljšati imunološki odgovor stimuliraju visoku proizvodnju razine alergena specifičnih IgG-antitijela koja štite polinoza pacijenta gutanjem allergensoderzhaschey pelud u svom tijelu.

Prilikom razvoja nove generacije alergotropina, izbor polioksidonija kao visoko molekularne težine imunostimulirajućeg nosača antigena bio je rezultat prethodno dobivenog pozitivnog iskustva.

Najzaslužnija područja u području daljnjeg razvoja promijenjenih oblika alergena uzimamo u obzir alergotropine: konjugirane oblike alergoza i imunostimulanta.

Trenutačno, to razvijen i proizveden allergotropin stvorio temelje allergoids iz peluda Timothy trave, breza i kadulja i polyionic medija - sintetička visoke molekularne imunostimulansa - polioksidonija.

Allergotropin pelud iz Timothy nazivom „Timpol” predstavlja allergoid Timothy pelud pripravljen iz pročišćenog alergena, zamrzavanjem sušena ekstrakt peludi povezan sa sintetičkim makromolekula polioksidoniem imunomodulatora (kopolimer N-oksida i 1,4-etilenpiperazina (N-karboksietil) 1, 4-etilen-piperazinijev bromid). To plavičasta prašak koji sadrži konjugat allergoidnoy oblik velikih i malih pelud alergene (sa Mw od 3 do 90 kDa) i polioksidonija.

Tekućina alergotropina (za injekcije), dobivena otapanjem suhog pripravka u 1 ml standardne tekućine za razrjeđivanje za alergene, sadrži 1000 200 PNU peludna alergoida timothy.

Alergotropin se pohranjuje na suhom, zaštićenom od laganog mjesta pri temperaturi od 4 do 8 ° C. Rok trajanja 4 godine. Alergotropin se testira na ograničenom kontingentu volontera.

Za pripremu otopine za razrjeđivanje na 1 ml 0,9% -tne otopine natrijevog klorida doda se 0,5 ml Tween-20, a zatim 0,1 M otopinu Na2(NRA)4 do pH od 7,3.

Pripravak sadržava određeni aktivni oblik allergoidnuyu Timothy pelud alergen, a ima sposobnost interakcije sa specifičnim tome IgG antitijela za pozitivnu kontrolu serumu bolesnika s preosjetljivošću na pelud Timothy koji detektirati konjugat peroksidaze anti-IGS monoklonska protutijela tvore boje bojenje s mješavinom supstrata. Određivanje se provodi enzimski povezanim imunosorbenskim testom.

Reakcija je koristila kontrolne serume u usporedbi s kontrolnim pozitivnim i kontrolnim negativnim serumima. Kontrolni pozitivni serum sadrži specifična IgG antitijela na peludni alergen timothy čija razina odgovara optičkoj gustoći od najmanje 0,8. Kontrolni negativni serum ne sadrži IgG antitijela specifična za alergenu.

Da bi se procijenila imunogena aktivnost alergotropina u pokusima na životinjama, miševi se injiciraju intraperitonealno sa 100 ug dva puta tjedno. Nakon 3, 5, 6, 7 tjedana nakon početka imunizacije životinje su žrtvovane i količina cirkulirajućih IgG antitijela određena je u njihovim serumima pomoću ELISA.

Imunogenost allergotropina ispitan u bolesnika volontera s preosjetljivosti na pelud Timothy, tretira allergotropinom. Allergotropin u dozi od 0,1 mg proteina i 10 mg allergoid polioksidonija alergena potiče rast IgG-antitijela u Timothy pelud trava u serumu bolesnika nakon davanja lijeka.

Alergotropin iz timotne peludi koristi se za specifičnu imunoterapiju u bolesnika s pollinozom s alergijom na timothy pollen.

Alergotropin je propisan za specifičnu imunoterapiju u prisutnosti indikacija: pollinoza s preosjetljivosti na pelud timothy.

Prije uvođenja terapijskih doza allergotropina provesti procjenu osjetljivosti pojedinog pacijenta na lijek. Evaluacija se vrši metodom primiranja. Zajedno s testiranom pripravku kože ubod s alergenom i allergotorpinom svih ispitanika probadanja ispitivanja se izvode s 0,01% -tnom otopinom histamin dihidroklorida (pozitivna kontrola) i kontrole standardnog uzorka tekućine za peludi alergena (negativna kontrola).

Kada je postavljen prik-test, reakcija se uzima u obzir nakon 20 minuta, 6 - 24 sata (neposredna reakcija).

Inicijalna koncentracija lijeka je ona koja daje blago pozitivnu ili upitnu reakciju kod bolesnika s titranom alergovakcine.

Interval između injekcija može se smanjiti i povećati ovisno o toleranciji lijeka pacijentu. Nakon završetka SIT tečaja, primjena doza održavanja lijeka u količini od 1,0 ml (1000 PNU / ml konc.) S intervalom od 10-12 dana je moguće. Uvođenje doza održavanja alergotropina i stanja pacijenta zabilježeno je u povijesti bolesti (ambulantni dijagram) i dnevnik SIT-a.

Kada se primjenjuju terapeutske doze alergotropina, mogu se pojaviti lokalne alergijske reakcije neposrednog i odgođenog tipa. U takvim slučajevima preporučuje se pacijentu davati antihistaminski lijek prije operacije lijeka, kao i podijeliti dozu primijenjenog alergotropina u dvije (dvije ruke).

Allergotropin breza pelud nazivom „Berpol” predstavlja allergoid breza pelud alergen proizvodi od očišćenog, liofilizirano ekstrakt peludi povezane sa sintetičkim makromolekula polioksidoniem imunomodulatora (kopolimer N - 1,4 etilenpiperazina oksida i (N-karboksietil) -1, 4-etilen-piperazinijev bromid). To je nešto žućkasti prah koji sadrži konjugat allergoidnoy oblik glavni i sporedni breza peludi alergeni s MM = 3-90 kDa i polioksidonija.

Tekućina alergotropina (za injekcije) dobivena otapanjem suhog pripravka u 1 ml standardne tekućine za razrjeđivanje za alergene sadrži 1000 200 PNU alergoida peludi.

Alergotropin se pohranjuje na suhom, zaštićenom od laganog mjesta pri temperaturi od 4 do 8 ° C. Rok trajanja 4 godine. Alergotropin se testira na ograničenom kontingentu volontera.

Za pripremu otopine za razrjeđivanje na 1 ml 0,9% -tne otopine natrijevog klorida doda se 0,5 ml Tween-20, a zatim 0,1 M otopinu Na2(NRA)4 do pH od 7,3.

Pripravak sadrži specifičan oblik aktivne allergoidnuyu breza pelud alergene (s MM = 3-90 kDa), i ima sposobnost interakcije sa specifičnim citat pozitivnih serumu IgG-antitijela pacijenata s preosjetljivosti na pelud breza, koje otkrivaju konjugat peroksidaze monoklonalno anti- IgG antitijela, stvarajući bojenje bojom sa supstratnom smjesom. Određivanje se provodi enzimski povezanim imunosorbenskim testom.

Reakcija je koristila kontrolne serume u usporedbi s kontrolnim pozitivnim i kontrolnim negativnim serumima. Kontrolni pozitivni serum sadrži specifična IgG antitijela na alergenu peludi, čija razina odgovara optičkoj gustoći od najmanje 0,8. Kontrolni negativni serum ne sadrži IgG antitijela specifična za alergenu.

Da bi se procijenila imunogena aktivnost alergotropina u pokusima na životinjama, miševi su injektirani intraperitonealno sa 100 ug allergotropina dva puta tjedno. Nakon 3, 5, 6, 7 tjedana nakon početka imunizacije životinje su žrtvovane i količina cirkulirajućih IgG antitijela određena je u njihovim serumima pomoću ELISA.

Imunogenost alergotropina ispitivana je u dobrovoljnim bolesnicima s preosjetljivosti na pelud peludi tretiran alergotropinom. Alergotropin u dozi od 0,1 mg alergoidnog proteina i 10 mg poloksidonija stimulira rast titara alergenskog specifičnog IgG antitijela na brežuljku peludi u krvnom serumu pacijenata nakon primjene lijeka.

Alergotropin iz peludnog breza koristi se za specifičnu imunoterapiju kod bolesnika s pollinozom s alergijom na brežuljci.

Alergotropini se propisuju za specifičnu imunoterapiju u nazočnosti indikacija: pollinoza s preosjetljivosti na pelud.

Prije uvođenja terapijskih doza allergotropina provesti procjenu osjetljivosti pojedinog pacijenta na lijek. Evaluacija se vrši metodom primiranja. Zajedno s testiranom pripravku kože ubod s alergenom i allergotropinom svih ispitanika probadanja ispitivanja se izvode s 0,01% -tnom otopinom histamin dihidroklorida (pozitivna kontrola) i kontrole standardnog uzorka tekućine za peludi alergena (negativna kontrola).

Kada je postavljen prik-test, reakcija se uzima u obzir nakon 20 minuta, 6-24 sata (neposredna reakcija).

Inicijalna koncentracija lijeka je ona koja donosi blago pozitivnu ili upitnu reakciju kod bolesnika s titriranjem alergotropina.

Interval između injekcija može se smanjiti i povećati ovisno o toleranciji lijeka pacijentu. Nakon završetka SIT tečaja, primjena doza održavanja lijeka u količini od 1,0 ml (1000 PNU / ml konc.) S intervalom od 10-12 dana je moguće. Uvođenje doza održavanja alergothyrope i stanja pacijenta zabilježeno je u povijesti bolesti (ambulantni dijagram) i dnevnik SIT-a.

Kada se primjenjuju terapeutske doze alergotropina, mogu se pojaviti lokalne alergijske reakcije neposrednog i odgođenog tipa. U takvim slučajevima preporučuje se ubuduće prije uvođenja allergotropina pacijentu na antihistaminski lijek, te podijeliti dozu primijenjenog alergotropina u dvije (dvije ruke).

Allergotropin od Artemisia pelud, pod nazivom „polpolya” predstavlja allergoid Artemisia pelud pripravljen iz pročišćenog alergena, zamrzavanjem sušena ekstrakt peludi povezan sa sintetičkim makromolekula polioksidoniem imunomodulatora (kopolimer N-oksida i 1,4-etilenpiperazina (N-karboksietil) -1, 4-etilen-piperazinijev bromid). To lagano zelenkastog praška koji sadrži konjugirani obliku velikih i malih alergene iz Artemisia pelud (MW = 3-90 kDa) i polioksidonija.

Tekućina alergotropina (za injekcije) dobivena je otapanjem suhog pripravka u 1 ml standardne tekućine za razrjeđivanje za alergene, koji sadrži 1000 200 PNU peludnog alergijskog peluda.

Alergotropini se pohranjuju na suhom, zaštićenom od laganog mjesta na temperaturi od 4 do 8 ° C. Rok trajanja 4 godine. Alergotropin se testira na ograničenom kontingentu volontera.

Za pripremu otopine za razrjeđivanje na 1 ml 0,9% -tne otopine natrijevog klorida doda se 0,5 ml Tween-20, a zatim 0,1 M otopinu Na2(NRA)4 do pH od 7,3.

Pripravak sadrži posebno aktivni oblik allergoidnuyu Artemisia pelud alergen, a ima sposobnost interakcije sa specifičnim tome IgG-antitijelo pozitivnog kontrolnog seruma bolesnika preosjetljive na Artemisia pelud, koja detektiraju monoklonsko peroksidaznog konjugata anti-IgG-antitijela tvore boje bojenje s mješavinom supstrata. Određivanje se provodi enzimski povezanim imunosorbenskim testom.

Reakcija je koristila kontrolne serume u usporedbi s kontrolnim pozitivnim i kontrolnim negativnim serumima. Kontrolni pozitivni serum sadrži specifična IgG antitijela na peludni alergen Artemisia, čija razina odgovara optičkoj gustoći od najmanje 0,8. Kontrolni negativni serum ne sadrži IgG antitijela specifična za alergenu.

Da bi se procijenila imunogena aktivnost alergotropina u pokusima na životinjama, miševi su injektirani intraperitonealno sa 100 ug allergotropina dva puta tjedno. Nakon 3, 5, 6, 7 tjedana nakon početka imunizacije životinje su žrtvovane i količina cirkulirajućih IgG antitijela određena je u njihovim serumima pomoću ELISA.

Alergotropini od peludnog pelina koriste se za specifičnu imunoterapiju u bolesnika s pollinozom s alergijom na pelud pelud.

Alergotropini se propisuju za specifičnu imunoterapiju u nazočnosti indikacija: pollinoza s preosjetljivosti na pelud pelud.

Prije uvođenja terapijskih doza allergotropina provesti procjenu osjetljivosti pojedinog pacijenta na lijek. Evaluacija se vrši metodom primiranja. Zajedno s testiranom pripravku kože ubod s alergenom i allergotropinom svih ispitanika probadanja ispitivanja se izvode s 0,01% -tnom otopinom histamin dihidroklorida (pozitivna kontrola) i kontrole standardnog uzorka tekućine za peludi alergena (negativna kontrola).

Kada je postavljen prik-test, reakcija se uzima u obzir nakon 20 minuta, 6-24 sata (neposredna reakcija).

Inicijalna koncentracija lijeka je ona koja donosi blago pozitivnu ili upitnu reakciju kod bolesnika s titriranjem alergotropina.

Interval između injekcija može se smanjiti i povećati ovisno o toleranciji lijeka pacijentu. Nakon završetka SIT tečaja, primjena doza održavanja lijeka u količini od 1,0 ml (1000 PNU / ml konc.) S intervalom od 10-12 dana je moguće. Uvođenje doza održavanja alergotropina i stanja pacijenta zabilježeno je u povijesti bolesti (ambulantni dijagram) i dnevnik SIT-a.

Kada se primjenjuju terapeutske doze alergotropina, mogu se pojaviti lokalne alergijske reakcije neposrednog i odgođenog tipa. U takvim slučajevima preporučuje se ubuduće prije uvođenja allergotropina pacijentu na antihistaminski lijek, te podijeliti dozu primijenjenog alergotropina u dvije (dvije ruke).

Izum je objašnjen u Tablici. 1-6 (vidi na kraju teksta).

Popis korištenih literature
1. Patent RU 1580617, 1997, IPC A 61 K 39/145.

2. Patent RU 2139742, 1999, A 61 K 35/14.

3. Patent RU 2139742, 1999, A 61 K 35/14.

4. Carter E. B., Detoxified extract of pollen, U.S.A., 1935, Pat. 20198088.

5. Marsh D.G., Lichtenstein L.M., Studies on allergoid., J. Allergy, 1970, v.45, n2, str. l25.

6. Patterson R., Suszko I.M., McIntire F.C., polimerizirani antigeni Ragweed E.I. Priprema i imunološka ispitivanja, J. Immunol., 1973a, v. 110, n.5, str. l402.

7. Patterson R., Suszko I.M., Pruzansky J.J. et al., Polimerizirani antigenski konjukt E.II. Studije eliminacije in vivo i reaktivnost s protutijelnim sustavima. J. Immunol., 1973 b, v. 110, n.5, str. 1413.

8. King TP, Norman P.S., Tao N., Kemijska modifikacija glavnog alergena peludnog antigena E. ragweed, Immunochemistry, 1974, v. 11, str. 83.

9. Lee W.J., Sehon A.H., Suzbijanje reaginskih protutijela s modificiranim alergenima. Smanjenje alergije proteinskih alergena konjugacijom na polietilen glikol. Int. Arch. Allerg. Appl. Immunol., 1978, v. 6, n. 2, str.

10. Lee W.J., Sehon A.H., Suppression of reaginic antitijela s modificiranim alergenima. Ukidanje reaginskih antitijela s alergenima konjugiranim u polietilen glikol. Int. Arch. Alergiju appl. Immunol., 1978, str. 56, n. 3, str. 193.

11. Raikis B.N., Voronkin N.I. "Medicinski alergeni". L., Med., 1987, 155 st.

12. Illustovich N.A. Biološka svojstva alergoza iz peludi. C-. disertacija. Godina 1983.

1. Alergotropin za liječenje polinomi, naznačen time, da sadrži alergijske biljke alergena peludi, dobivenog utječući na ukupnu frakciju koja se sastoji od glavnih i malih alergena iz M.v. 3-90 kD spojeva, uključujući reaktivne proteinske skupine modificirane uglavnom s formaldehidom i povezani sintetički imunomodulator poloksidonija.

2. Alergotropin prema zahtjevu 1, naznačen time, da sadrži peludni alergoid timote, breze ili pelina.

3. Postupak za liječenje polinoma, naznačen time, da se bolesniku primjenjuje alergotropin kao što je opisano u zahtjevu 1, davanje lijeka počinje razrjeđivanjem od 10-4, za liječenje, do 15 injekcija.

4. Postupak prema zahtjevu 1, naznačen time, da se provodi tretiranje polinoma uzrokovanih peludom od timote, breze ili pelina.

Alexander Igorevich Martynov

Opis:

Aleksandar I. Martynov, PhD, autor deset patenata i više od 170 publikacija. Pod vodstvom AI. Martynov zaštićena pet teza za stupanj kandidata nauk.Oblast interesa: teorijske, znanstvene-tehničke i organizacijske osnove za metodologiji immunomonitoringa, automatiziranih računalnih programa za kratkoročno i dugoročno prognozu sekundarnih imunodeficijencija, nova generacija dijagnostičkih sustava za ispitivanje na test lateks aglutinacije za otkrivanje antitijela na etiopatogene čimbenike u zaraznim bolestima, stvaranje softverskog i hardverskog kompleksa za automatizirano tsenki imunološki status, proučavanje molekularne strukture IgG u različitim fazama imunološkog odgovora u patologiji.
Vodeći znanstveni smjerovi
Imunomonitoring i prognoza razvoja sekundarnih stanja imunodeficijencije.
Razvoj dijagnostičkih testova nove generacije na osnovi lateks aglutinacije za otkrivanje protutijela na enterobakterije i detekciju aktivnosti CRP i RF.
Proučavanje dinamike promjena u molekularnoj strukturi IgG u različitim fazama tijeka zaraznih i autoimunih procesa.
Stvaranje zaštitnog lijeka koji štiti od bolesti virusa gornjih dišnih puteva na osnovi strukture bakterijske stanične stijenke - GMF.

Glavni inovativni ciljevi
Implementacija u praktičnom zdravlja immunomonitoringa i automatiziranih računalnih programa „prognoza” za rano otkrivanje imunodeficijencije država i predviđanje razvoja sekundarnih imunodeficijencije država s ciljem obavljanja adekvatnog imunoterapija i prevencija.
Stvaranje i implementacija softverskog i hardverskog kompleksa za praktičnu zdravstvenu skrb za automatsko bilježenje rezultata procjene imunološkog statusa.
Uvođenje Latex test sustava u praktičnu zdravstvenu zaštitu.

Martynov Alexander Igorevich

Opis:

Aleksandar I. Martynov, PhD, autor deset patenata i više od 170 publikacija. Pod vodstvom AI. Martynov zaštićena pet teza za stupanj kandidata nauk.Oblast interesa: teorijske, znanstvene-tehničke i organizacijske osnove za metodologiji immunomonitoringa, automatiziranih računalnih programa za kratkoročno i dugoročno prognozu sekundarnih imunodeficijencija, nova generacija dijagnostičkih sustava za ispitivanje na test lateks aglutinacije za otkrivanje antitijela na etiopatogene čimbenike u zaraznim bolestima, stvaranje softverskog i hardverskog kompleksa za automatizirano tsenki imunološki status, proučavanje molekularne strukture IgG u različitim fazama imunološkog odgovora u patologiji.
Vodeći znanstveni smjerovi
Imunomonitoring i prognoza razvoja sekundarnih stanja imunodeficijencije.
Razvoj dijagnostičkih testova nove generacije na osnovi lateks aglutinacije za otkrivanje protutijela na enterobakterije i detekciju aktivnosti CRP i RF.
Proučavanje dinamike promjena u molekularnoj strukturi IgG u različitim fazama tijeka zaraznih i autoimunih procesa.
Stvaranje zaštitnog lijeka koji štiti od bolesti virusa gornjih dišnih puteva na osnovi strukture bakterijske stanične stijenke - GMF.

Glavni inovativni ciljevi
Implementacija u praktičnom zdravlja immunomonitoringa i automatiziranih računalnih programa „prognoza” za rano otkrivanje imunodeficijencije država i predviđanje razvoja sekundarnih imunodeficijencije država s ciljem obavljanja adekvatnog imunoterapija i prevencija.
Stvaranje i implementacija softverskog i hardverskog kompleksa za praktičnu zdravstvenu skrb za automatsko bilježenje rezultata procjene imunološkog statusa.
Uvođenje Latex test sustava u praktičnu zdravstvenu zaštitu.

Institut za imunologiju Martynov Alexandr Igorevich

Adresa: 115 478, Moskva, Kashirskoye autocesta, 24, zgrada. 2

tel: (499) 616-49-25

Khaitov Rakhim Musayevich

Martynov Alexander Igorevich

Prvi zamjenik ravnatelja

Ilyina Natalia Ivanovna

Zamjenik ravnatelja za klinički rad

Alekseev Leonid Petrovich

Zamjenik ravnatelja za aktivnosti istraživanja i inovacija

Skvortsov Valery Yurievich

Znanstveni tajnik Instituta

Federalna državna proračunska institucija

>> Odjel 10 u temeljnoj imunologiji (Khaitov RM)

>> Odjel br. 20 imunološke biotehnologije (Ataullakhanov RI)

>> Odjel № 30 imunogenetike (Alekseev LP)

>> Odjel № 40 stanične imunologije (Yarilin AA)

>> Odjel № 50 imunobiologija AIDS-a (Sidorovich IG)

>> Odjel № 60 kliničke dijagnostike

>> Odjel br. 70 nanobiomedicinskih tehnologija (Khaitov M.R.)

>> Odjel 80 u kliničkoj imunologiji i alergologiji (Gushchin IS)

>> Odjel № 90 imunodijagnostika i imunokorekcija (Pinegin BV)

Odjel za poliklinike № 1 (Luss LV)

Odjel za imunopatologiju br. 2 (35 kreveta) (Latysheva TV)

Odjel za imunopatologiju djece br. 3 (20 kreveta) (Yartsev MN)

Odjel za alergologiju i imunopatologiju kože br. 4 (15 kreveta) s ozonskom terapijom (Fedenko ES)

Odjel za bronhijalnu astmu br. 5 (45 kreveta) (Chervinskaya TA)

Odjel za alergologiju br. 6 (30 kreveta) (Shulzhenko AE)

Odjel za reanimaciju i intenzivnu njegu № 7 (6 kreveta) s efektivnim načinima liječenja (Pirogov SN)

Klinički i dijagnostički laboratorij (Mukhteremova GA)

Odjel za dijagnostiku X-zraka № 61 (Aminova GE)

Odjel za ultrazvučnu dijagnostiku № 62 (Korobova VV, Gaydamako TN)

Odjel za funkcionalnu dijagnostiku № 63 (Kondratenkova ER)

Endoskopski odjel № 64 (Dykhanov II)

Laboratorij za infekcije imunološkog sustava № 66

Zavod № 89 kliničkih i epidemioloških studija (Kurbacheva OM)

Računatska tomografija

Ulazni ured broj 17 (Snetkova LA)

Odjel za fizioterapiju i rehabilitaciju br. 18 (Lapshin NN)

Apoteka № 20 (Simakova ON)

Središnja sterilizacija № 21

Informativni i tehnički odjel (Feoktistov VV)

Alergologija i imunologija

Alergologija i imunologija, prekvalifikacija (samostalno)

Temeljna pitanja cijepljenja

Temeljna pitanja cijepljenja (samostalno)

Sekundarna imunodeficijencija kod djece

Klinička laboratorijska dijagnostika s osnovama laboratorijske analize u imunologiji i alergologiji (samostalni)

Klinička laboratorijska dijagnostika, prekvalifikacija (samostalno)

Određivanje T- i B-stanica korištenjem monoklonskih antitijela (samonosivi)

Analiza imunoenzima (samonosivi)

PCR dijagnostika u medicini (samostalno)

Dijagnostika onomarkera (samostalno)

Izvođenje istraživačkih radova na temeljnoj i primijenjenoj imunologiji i alergologiji, imunogenetici, fiziologiji imunološkog sustava:

- genetika, molekularno-stanični imunitet, klinička imunologija;

- genetika, molekularni i stanični mehanizmi alergija: prevencija, dijagnoza i liječenje alergijskih bolesti;

- fiziologije i patologije imunološkog sustava

- imunološka biotehnologija: cjepiva nove generacije, lijekovi za liječenje imunomodulatora, dijagnostici;

- razvoj novih terapijskih i profilaktičkih lijekova, temeljenih na nanotehnologiji, za prevenciju i liječenje društveno značajnih virusnih infekcija;

- procjenu i praćenje imunološkog stanja stanovništva, osoblja štetnih industrija, sudionika u uklanjanju posljedica radijacijskih nesreća;

- AIDS: stvaranje dijagnostičkih, preventivnih i kurativnih lijekova;

- imunoekologija i imunotoksikologija: proučavanje učinaka ionizirajućeg zračenja, otrovnih tvari i komponenti raketnih goriva na imuni sustav;

- imunogenetika ljudi i životinja;

- imunofarmakologija i imunorehabilitacija;

- standardizacija i mjeriteljska podrška imunološkim studijama;

- koordinacija znanstvenih istraživanja na području imunologije i alergologije u ruskim znanstvenim institucijama;

- pružanje dijagnostičke, preventivne i kurativne specijalizirane pomoći stanovništvu u klinici i znanstvenom i savjetodavnom odjelu Instituta, kao i tijekom ekspedicija na nepovoljna područja u zemlji;

- osposobljavanje visoko kvalificiranih stručnjaka. Osim toga, u laboratorijima na radnim mjestima Institut priprema stručnjake za alergologije i imunologe za obuku stanovništva i poslijediplomskog studija.

Za širenje najnovijih dostignuća u području alergije i imunologije, širenje odnosa između znanstvenih i medicinskih stručnjaka iz Rusije i inozemstva na inicijativu Instituta osnovana i aktivno posluje ruski savez alergologiju and Clinical Immunology (Raak). RAAKI je neprofitna javna organizacija. Glavni smjer njegove aktivnosti je integracija i širenje najnovijih dostignuća u području alergologije i imunologije, informacijske podrške znanstvenih i kliničkih događaja. Tijekom godina Raak održao brojne međunarodne i sve ruske kongresa, konferencija, simpozija, seminara škola uz sudjelovanje vodećih znanstvenika i liječnika u SAD-u, Engleskoj, Francuskoj, Italiji, Njemačkoj, itd RAAKI također predstavlja Rusiju u vodećim međunarodnim znanstvenim i medicinskim organizacijama. RAAKI ima pravo na odlučujući glas i član je vodećih međunarodnih organizacija - Europske akademije za alergije i kliničke imunologije (EAACI) i Svjetske alergološke organizacije (WAO). Predsjednik RAAKI, ravnatelj Instituta, akademik R.M. Khaitov je član Vijeća nacionalnih znanstvenih udruga EAACI, WAO. Godišnji kongresi EAACI i WAO najveći su i najvažniji međunarodni događaji. Sudjelovanje osoblja Instituta i vodstvo RAAKI-a na ovim forumima korisno je i nužno, jer Sve informacije, diskusije sa stranim kolegama, razmjenu iskustava ne samo obrazovne i propagandne karakter, ali i omogućiti nam da u obzir širok raspon pritiskom problema alergologiju i kliničku imunologiju - od molekularnih mehanizama za upravljanje pacijenta.

Studije provedene u okviru međunarodnog programa za proučavanje HLA sustava dovele su do velikih uspjeha u genotipizaciji, odabiru donatora za transplantaciju organa i tkiva, stvaranje sustava za genodiagnostiku. Razvijeni su originalni reagensi za genotipiranje HLA, koji su prošli međunarodnu kontrolu kvalitete, identificirani su genetički čimbenici predispozicije za niz bolesti, osobito na dijabetes melitus koji ovisi o inzulinu.

U studenom 2012. godine, izaslanstvo Instituta aktivno je sudjelovalo u organiziranju i provođenju o rusko-indijski znanosti i tehnologije Forum „Razvoj nove generacije cjepiva i javno imunizacije droge”, koji je održan u Delhiju (Indija) pod vodstvom Ministarstva obrazovanja..

Jedan od najučinkovitijih alata za razvoj znanstveno-tehnološkog kompleksa Rusije jest sustav državnih znanstvenih centara (SSC). Status državnog znanstvenog centra može se dodijeliti znanstvenoj organizaciji koja ima jedinstvenu eksperimentalnu opremu, ima znanstvene djelatnike i visoko kvalificirane stručnjake, a čije su znanstvene i (ili) znanstvene i tehničke djelatnosti dobile međunarodno priznanje.

složena priprema zasnovana na peludnim alergenima od breze i muramilpeptida

Izum se odnosi na kompleksni injekcijski pripravak za liječenje pollinoze ASIT metodom. Navedeni preparat se dobiva jednostavnim miješanjem allergoid breza peluda i muramil peptidi bez kemijskih sastojaka konjugacije, i pri dozi od 1000 PNU allergoid dodano 2 mg muramil peptidi. Izum se odnosi na značajno povećanje imunološkog odgovora i stimulira visoku razinu proizvodnje specifičnih IgG antitijela, a također smanjuje tijek liječenja pollinoze, što smanjuje mogućnost komplikacija. 1-il, 2 tablica.

Crteži na patent Ruske Federacije 2537225

Izum se odnosi na područje medicine.

Do danas, alergijske bolesti na ovaj ili onaj način pate od 20% svjetske populacije. Ukupan broj osoba oboljelih od alergijskih bolesti u Ruskoj Federaciji je oko 20 milijuna ljudi, uključujući 8 milijuna ljudi s peludnim alergijama. Problem odgovarajuće alergijske terapije je akutniji nego ikad.

Antihistaminici, tako široko oglašavane u medijima, kupiruya kliničke manifestacije u ovom trenutku, ne eliminirati uzrok bolesti. Alergospetsificheskaya imunoterapija (ASIT) vam omogućuje iskorjenjivanje uzroka patologije. Uvođenje određenog uzorka diže doza alergena dovodi do proizvodnje značajne količine toga protiv IgG klase antitijela koja se vežu alergen ulazi u tijelo, čime se izbjegavaju njegovo vezivanje s IgE i pokrenuti kaskadu reakcija allergopatologicheskih. Postoji takozvani „prebacivanje” odgovor imunološkog sustava na IgE IgG odgovora. Trenutno, za ASIT, koriste se uglavnom alergeni dobiveni ekstrakcijom vodeno-soli.

Alergoid je kemijski modificiran alergen i ima prednosti nad posljednjim, jer s kemijskom modifikacijom, dolazi do smanjenja alergenosti i rizika od anafilaktičkog šoka. alergen pretvorba allergoid kemijskom modifikacijom u prisutnosti formaldehida, što dovodi do interakcije komponenti visoke i niske molekularne težine, pomaže očuvanju svojstva allergoid induciraju sintezu antitijela. Ova akcija je pojačan zbog krute i stabilnu strukturu allergoid molekule otporne na učinke denaturiranje, za razliku od originalnog alergen, a također pridonosi produljenju akcije allergoid jer je njegova uništenja u tijelu pacijenta će biti sporiji.

Redukcija allergenicity alergena u polimerizira povezani, s jedne strane, sa smanjenjem broja antigenske determinante kao rezultat reakcije s aldehidne skupine, s druge strane - na nedostupnosti reagin druge determinante skriveni unutar polimera velike molekularne težine. Pozitivan učinak na imunogenost vrši se povećanjem molekularne težine i stvaranjem čvršćih intramolekularnih veza.

S tim u vezi, kombinacija modificiranog alergena s muramilpeptidima može biti obećavajuća. Kombinirajući allergoid s muramil peptidi omogućuje značajno poboljšati imunološki odgovor stimuliraju visoku razinu proizvodnje specifičnih IgG-antitijela koja štite pacijenta gutanjem alergena u svom tijelu.

Pripreme serije muramilpeptida postojale su tek od 1974. godine, a samo 2 lijekova imaju dozvolu za liječenje: romurtid u Japanu i likopid u Rusiji. Potonji je trenutno podvrgnut kliničkim ispitivanjima u SAD-u, Engleskoj, Australiji i Danskoj. Nema podataka o upotrebi muramilpeptida u alergopatologiji. Dobiveni kompleksni pripravak na bazi alergena peludi breze i muramilpeptida nema analoge u Rusiji i inozemstvu.

Glavni cilj u tijelu imunomodulatori mikrobiološkog porijekla, uključujući muramilpeptidnogo serije fagocitskih stanice. Pod utjecajem imunomodulatori je jačanje funkcionalnih svojstava fagocita: povećava intenzitet fagocitozu i unutarstanične ubijanje bakterija apsorbira, kao i proizvodnju proupalnih citokina potrebnih za pokretanje humoralne i stanične imunosti.

Korištenje kombinacije alergoza i imunomodulatora omogućuje smanjenje tijeka liječenja (od 45 injekcija do 15) što smanjuje mogućnost komplikacija (anafilaktičke reakcije) tijekom liječenja.

Stoga, visoka učinkovitost, sigurnost i niske cijene složene pripreme zasnovane na peludnim alergenima od breze i muramilpeptida čine ga izrazito obećavajućim i konkurentnim na tržištu antialergijskih lijekova.

Nema analoga predloženog izuma.

Cilj predmetnog izuma je osigurati kompleksan pripravak koji se temelji na alergensima peludnog pelusa i muramilpeptida za liječenje pollinoze.

Tehnički rezultat predloženog izuma sastoji se u značajnom poboljšanju imunološkog odgovora i stimulaciji visoke razine proizvodnje specifičnih IgG antitijela koja pružaju zaštitu pacijentu kada alergen uđe u tijelo.

Riješiti taj problem je bio razvijen kompleksan injekcije pripravak zasnovan na breze peludi alergena i muramil peptidi za liječenje polinoza Asit postupka, kompleksa lijek pripravljeni jednostavnim miješanjem allergoid i muramil peptidi koji se izdaju bez kemijskih sastojaka konjugacije. Pri dozi od 1000 PNU alergoida, dodano je 2 mg muramilpeptida.

Lijek je namijenjen liječenju pollinoze ASIT metodom. Uvođenje određenog uzorka rasta doza lijeka dovodi do produkcije znatne količine toga protiv IgG klase antitijela koja se vežu alergen ulazi u tijelo, čime se izbjegavaju njegovo vezivanje s IgE i pokrenuti kaskadu reakcija allergopatologicheskih. Postoji tzv. "Prespajanje" imunološkog sustava tijela od IgE odgovora na IgG odgovor.

Izumje ilustriran sljedećim grafičkim materijalima.

Tablica 1 prikazuje rezultate određivanja imunogenosti složenog pripravka baziranog na alergensima peludi i muramilpeptida.

Tablica 2 prikazuje rezultate procjene hiposenzitivne aktivnosti alergoida peludi breze i složenog pripravka baziranog na alergenu peludnog peluda i muramilpeptida tijekom eksperimenta.

Slika 1 prikazuje vrijednosti OP u ELISA-u kada neutralizira IgE antitijela za alergenu, alergiju i kompleksnu pripremu baziranu na alergensima breza pelina i muramilpeptida.

Sastav kompleksa injekcijski pripravak na temelju breze peludi alergena i muramil peptidi dobiveni jednostavnim miješanjem allergoid i muramil peptidi bez kemijske konjugacije komponente, pri čemu je doza od 1000 PNU allergoid doda 2 mg muramil peptidi je izabran empirijski provesti studije u laboratorijskih životinja. U prvom koraku 5 korištene doze muramil peptidi - 0,5 mg, 1 mg, 2 mg, 5 mg, 10 mg. Doze su ponovno izračunate za miševe (hibridi (CBA × C57 B1 / 6) F1 težine od 19 do 21 grama) iz izračuna da je planirana pojedinačna terapeutska doza namijenjena osobi koja teži 70 kg. Imunomodulirajućih aktivnost je procijenjena kao muramylpeptides utjecajem dobiveni pripravak za sposobnost da proizvedu stanice koje proizvode antitijela (ASC) kao odgovor na jedan timusa ovisan ovčjih crvenih krvnih stanica na antigen (SRBC). Rezultati su procijenjeni od zbroja dvije serije eksperimenata, svaki je izveden u 5 eksperimentalnim grupama miševa i kontrolne skupine (10 miševa po skupini).

Utvrđeno je da primjena lijeka muramil peptidnog lijeka kod miševa kod 1, 2 i 5 mg kod miševa dovodi do dvostrukog povećanja broja AOA u slezene imuniziranih miševa. Za doze od 0,5 mg i 10 mg, povećanje broja AOK promatrano je s faktorom od 1,5. Dobiveni učinak ostvaren je ne na štetu povećanja broja nukleiranih stanica (SSC) u slezama, već zbog povećanja broja aktivnih proizvođača antitijela. Za drugu fazu studije pripravljene su 3 inačice složenog pripravka, pri čemu su odabrane doze muramilpeptida (1 mg, 2 mg, 5 mg) dodane po 1000 PNU alergoida.

U drugom koraku procjenjuje učinak lijekova na bazi breze peludnih alergena i tsitokinoproduktsiyu muramil peptidi na ljudskim limfocitima, korištenjem komercijalnog sustava za ispitivanje Bender MedSystems. Istraživali sadržaj IL-4 u supernatantima limfocita stimuliranih s alergenom ili allergoid kompleksa pripravka na temelju breze peludi alergena i muramil peptidi (nakon prethodne inkubacije od 18 sati). Formulacije koje sadrže 2 mg i 1 muramil peptidi, nema nikakvog utjecaja na proizvodnju IL-4, u zdravih donora i bolesnika s alergijskim rinitisom. Za pripravak koji sadrži 5 mg muramilpeptida, primijećeno je lagano povećanje sadržaja IL-4 u supernatantima. Optimalna doza bila je 1 mg i 2 mg muramilpeptida na 1000 PNU alergoida.

Na temelju rezultata istraživanja, prednost je davana lijeku koji sadrži više imunomodulatora - 2 mg muramilpeptida na 1000 PNU alergoida.

Budući da je razvijeni lijek namijenjen liječenju allergopatologije, dodavanje muramilpeptida ne smije mijenjati alergijska svojstva lijeka u usporedbi s originalnim alergoidom.

Uspoređene su imunogenosti i rezidualna alergenost. Štoviše, imunogenost ne bi smjela biti manja, a rezidualna alergenacija nije viša od odgovarajućih vrijednosti za izvorni alergoid.

Određivanje imunogenosti i ostatne alergenosti lijekova provedeno je u enzimskom imunotestu. Polistirenske ploče primijenjene su respektivno:

- allergoid (serija Sab9-11-1) izrađene od breze peludi alergenom (puno Sb4-11-1) dobivena u FGBI „Imunološki zavod” FMBA Rusija, kao kontrola, kao i izvorni lijek;

- Kompleks za injekcije pripravak na bazi breze peludi alergena i muramil peptidi dobiveni jednostavnim miješanjem allergoid i muramil peptidi bez kemijske konjugacije komponente, pri čemu je doza 1000 PNU allergoid doda 2 mg muramil peptidi.

Imunogenost lijeka određena je sposobnošću interakcije s specifičnim IgG iz seruma pacijenata. Kao pozitivna kontrola, korišten je skupni serum s visokim sadržajem specifičnih IgG antitijela. Serumi koji sadrže najmanje 10 mgA / l odabrani su pomoću komercijalnih komada fluoroimmunoenzimskih kita, na ImunoCAP uređaju (Pharmacia biotech). Rezultati određivanja imunogenosti lijeka prikazani su u tablici 1.

Može se vidjeti da su optičke gustoće dobivenih pripravaka i kontrola vrlo blizu, razlika je nepouzdana (p> 0,05). Tako je pokazano da imunogenost proizvedenog pripravka nije promijenjena u usporedbi s izvornim alergoidom od peludnog breza.

Kao izvor allergoid proizveden lijek trebao bi imati smanjenu specifičnu aktivnost u usporedbi s pročišćenim breze pelud alergena iz koje je spreman lijek - alergijske aktivnost izvora alergena smije prelaziti allergoid alergijske aktivnost ili droga nije manji od 40%.

Određivanje je provedeno ELISA inhibicijom. Kao pozitivna kontrola, upotrijebljen je skupni serum s visokim sadržajem specifičnih IgE protutijela. Seraje za nju koja je sadržavala najmanje 85 kVA / l su odabrana korištenjem komercijalnih komada fluoroimmunoenzimskih kita na ImmunoCAP uređaju (Pharmacia biotech).

Rezultati su prikazani na slici 1. Rezultati reakcije su procijenjeni na grafikonu razlike u OP uzoraka koji se uspoređuju na 2 točke linearnog dijela kalibracijske krivulje, a razlika nije manja od 40%. Iz slike 1 vidljivo je da je vezanje alergena na specifični IgE kontrolnog seruma veći, vrijednosti OP u ELISA-u kada neutraliziraju antitijela su znatno niže nego za odgovarajuće koncentracije alergoida i lijeka, što ukazuje na bolje vezanje na specifični IgE kontrolni serum. U dvije točke linearnog dijela kalibracijske krivulje, razlika OD za alergenu i alergiju, zajedno s lijekom koji je pripravljen na osnovi, premašio je 40%. Dakle, pripravci dobiveni od nas, kao i izvorni alergoidi od breza pelina, imaju manje alergenosti, u usporedbi s alergenom.

Izvršili smo komparativna evaluacija imunogenih svojstava allergoid breza pelud i kompleksnu pripremu za injektiranje baziran na alergene peludi breze i sposobnost da stimuliraju muramil peptidi sintezu blokiranje IgG-antitijela u laboratorijskih životinja hiposenzibilizacija.

Breza alergen senzibilizacija izvedena intraperitonealo 10 ug / miš u volumenu od 0,2 ml s Freundovim pomoćnim sredstvom tri puta u intervalima od 7 dana.

Mišji hibridi (ženke težine 20 g) korištene su kao donori iz Stolbovaya kulture GUSBT RAMS. Istraživanja su provedena na 30 senzibiliziranih miševa.

20 izvedena naravno desenzitizacija senzibiliziranih životinja: Skupina 1 (10 životinja) - allergoid breza pelud, grupa 2 (10 životinja) - složena injekcija temelje breza pelud alergena i muramil peptidi senzitiziranih životinja 10 iznosu kontrolne skupine.

Tijek hyposensitizacije proveden je prema slijedećoj shemi:

Injekcija 0.01 ug / miš

Injekcija 0.05 ug / miš

Injekcija od 0,1 mcg / miš

Injekcija od 0,1 mcg / miš

Injekcija od 0,1 mcg / miš

Injekcija 0.5 mcg / miš

Injekcija 0.5 mcg / miš

Injekcija 1,0 mcg / miš

Injekcija 1,0 mcg / miš

Injekcija 2,0 mcg / miš

Injekcija 2,0 mcg / miš

11 injekcija lijeka bila je dovoljna da se dobije intenzivna stimulacija IgG odgovora. Nakon 3 dana usmrćene nakon završetka hiposenzibilizacija životinja, krv se prikupi u epruvete, centrifugiran, a serum je odvojena, koja je zatim korištena u ELISA za određivanje IgG-specifično antitijelo. Rezultati su prikazani u tablici 2.

IgG razini blok antitijela u miševa nakon desenzitizacije allergoid usporedbi s istim alergenom senzibilizirane životinje povećan za 60%, a nakon desenzibilizacije kompleksa lijek - 150%.

Povećanje imunogenosti prijavljenog kompleksnog pripravka za ubrizgavanje prikazano je u usporedbi s početnim alergoidom.

FORMULA IZUMA

Kompleks za injekcije pripravak na bazi breza peludi alergene i muramil peptidi za liječenje metodom polinoza Asit dobivaju se jednostavnim miješanjem allergoid i muramil peptida, bez konjugacija kemijskih sastojaka, a pri dozi od 1000 PNU allergoid doda 2 mg muramil peptidi.